[发明专利]Bt发酵中增效物质的离交回收方法

说明书

技术领域

本发明涉及回收的增效物质技术领域，更具体涉及一种Bt发酵中增效物质 的离交回收方法，离子交换法工艺回收上清液中的增效物质，可以与高倍离心菌 浆混合加助剂生产出16000IU/μl的Bt SC液态制剂，可以生产出新型的Bt制 剂，丰富剂型品种，满足特殊市场需求。解吸液喷雾干燥制得上清粉与原粉混合 可以生产出高品质的Bt原粉，提高效价回收率，增加经济效益。

背景技术

随着人们环保意识的提高，生态环境越来越恶劣的压力，人们对农药的残留 要求也越来越高，对绿色食品的渴望和需求也越来越强烈，生物农药作为一种环 保、无残留的农药在近几十来深受各国的关注，也在不断深入的大力发展中。Bt 商品化制剂是目前世界上使用最广泛的生物农药之一，对其进行了很深入的研 究、应用、推广。近年研究发现某些苏云金芽孢杆菌(Bt)或蜡质芽孢杆菌发酵上 清液中含有某种自身无杀虫活性，但对Bt的晶体和芽孢表现较强增效作用的活 性成分。如苏云金芽孢杆菌HD-1菌株产生一种非蛋白质的小分子可溶性增效因 子，当与晶体混用时有增效作用，KB500菌株(Bt.Kurstaki)能产生更多的这 种增效因子，对斜蚊夜蛾(Spodoptera litura)的增效作用可达32倍 (Asano，S.，，et al.，1994；Asano，S.，，et al.，1995)。苏云金芽孢杆菌GC-91 菌株发酵上清液有增效作用，上清液中含有某种增效物质，离心丢弃上清液是导 致毒力严重损失的根本原因，上清液对粉剂的最高增效倍数可达23.5倍，且上 清液对不同菌粉的增效力不同，对GC-91菌粉增效极为显著，而对HD-1菌粉较 为缓慢(李青等，1997)。苏云金芽孢杆菌79007发酵上清液对苏云金芽孢杆菌 7216-F₂和HD-1-580有明显的增效作用，增加30％上清液，7216-F₂和HD-1-580的 对棉铃虫效价分别提高46％和50％％，增加50％，提高幅度更大，效价增加1倍以上 (吴继星 等，1997)。对苏云金芽孢杆菌Bta的发酵液进行生物测定，发现发酵 原液(Bta离心沉淀物+上清液)对斜纹夜蛾三龄幼虫的LC₅₀比去掉上清液的沉 淀物降低了37.2％，说明发酵上清液能够显著提高发酵沉淀物对斜纹夜蛾的毒力 (余健秀等，2002)。

蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)菌株UW85是最近发现的具有生物防治病 毒潜能的菌株。1989年美国威斯康辛大学的Handelsman从苜蓿植物的根部首次 分离到蜡状芽孢杆菌菌株UW85，通过研究表明菌株UW85的培养液可以抑制苜蓿 猝到病的发生，其抗病机理是因为该菌株在形成芽孢的同时还产生两类抗生素， 通过离子交换树脂和高压纸相电泳对这两种抗生素进行纯化，一类抗生素命名为 Zwittermicin A，它是一种分子量为396Da的氨基多元醇化合物(aminopolyol)， 另一类抗生素命名为Kanosamine，是一种3-氨基-3-脱氧D-葡萄糖的化合物 (Handlsman，，et al.，1990；Minler，et al.，1995；Silo-suh et al.，1994)。