[发明专利]激酶法生产培养用动物血清的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术与生物制品领域，具体涉及通过给供血动物注射激酶的关键途径生产出培养用动物血清的方法。

背景技术

培养用动物血清是生物技术研究及生物制品生产行业必不可少的原辅材料之一。目前，人们对培养物(尤其是体外培养的动物细胞、组织等)所需要的营养成分还研究的很不透彻，尤其是对这些培养物生长发育以及发挥生物学功能所必需的具有生物活性的微量营养成分(如激素、细胞因子、短链肽类等)更是知之甚少，且单一获取这些物质的成本还极其高昂，而动物血清--尤其是生长发育早期的动物血清中则大量含有这类物质，因此在目前情况下，体外培养物质量的好坏与操作者在培养基中所使用的血清质量的好坏有着极其密切的关系。

培养用动物血清的质量取决于血清中所含有的能刺激细胞生长的微量细胞因子有效含量、血清营养成分的含量以及其可被细胞利用的程度，而这些性状一方面与提供血清的动物本身生理机能有着一定的关系，而更主要的是与血清的获取和加工过程有着极其密切的关系。现行的培养用动物血清的生产工艺流程如下：供血动物(如胎牛、新生牛、兔等)→无菌条件下采血→分离血清→作为原料血清暂时冻存→在成品加工厂解冻→多重粗滤→除菌过滤→灭活或不灭活→检测→作为成品冻存→解冻使用。在这样的加工程序中，凝血是必然会出现的过程，在凝血过程中，纤维蛋白原被分解成纤维蛋白，大量的纤维蛋白相互交联，网络血清中其他营养成分形成凝血块。凝血块的形成不仅使血清产出量减少约10％，而且使血清的营养含量--尤其是决定血清营养价值的微量细胞因子的含量大大降低，但如若采取抗凝方法阻止凝血块形成，则血清中又会保留大量的纤维蛋白原的大分子物质，这些物质对动物细胞、组织类的体外培养物不仅没有营养价值，而且会影响培养物的生长、发育与生物学功能的发挥。因此，采用恰当的技术尽量减少血清中的营养物质参与凝血块形成，尽量使血清中的大分子蛋白质降解为短链蛋白质将会极大的提高血清对培养物的营养品质。

发明内容

本发明为了克服上述现有技术存在的问题及缺点，提供一种激酶法生产培养用动物血清的方法，本发明是利用某些激酶激活供血动物体内降解纤维蛋白的酶体系，以达到尽量减少血清成分参与血凝块的形成，提高血清营养物质含量，同时降低血清平均分子量、降低血清粘滞度等。

本发明技术方案为：A、本发明的技术路线：供血动物→静脉推注或肌肉注射由尿激酶或蚓激酶与肝素或肝素钠组成的混合制剂→等待一定时间→采血→分离血清→原料血清冻存→解冻→多级粗滤→除菌过滤检测→成品血清。

B、技术路线说明：

激酶法生产培养用动物血清的方法，按以下步骤进行：(1)、当用于采血的供血动物运输到采血场地后，称出供血动物的体重并记录其体重；(2)、按每公斤体重250-500单位尿激酶或500-1000单位的蚓激酶和100单位肝素或肝素钠的剂量，用无菌注射用水将尿激酶或蚓激酶和肝素或肝素钠配制成混合注射液，混合注射液体积量根据动物大小按每100公斤体重为30毫升，将该混合注射液通过静脉推注或肌肉注射方式注射入供血动物体内，3分钟内注射完成，等待0.5-1小时，将动物保定在采血架上，按无菌操作进行颈动脉采血；(3)、将采出的血液分装于离心机的经消毒处理后的离心杯中，无菌条件下离心分离血清，将分离出的血清分装于容器中，如：玻璃瓶、塑料袋等，作为原料血清放于-20℃条件下冻存；(4)、当需要精加工时，将原料血清放置在室温下让其自然解冻，送入血清精加工生产线上，在无菌条件下，依次通过孔径为1.2、0.8、0.65、0.45、0.2、0.1微米的滤膜逐级过滤，终端滤出的血清分装于灭菌容器中，如：玻璃瓶、塑料袋等，制得成品血清，成品血清经检测合格后直接使用或冻存备用。

C、本发明的创新点：在供血动物采血之前，先给动物注射用尿激酶或蚓激酶和肝素或者肝素钠配制而成的混合注射液，该注射液能够激活血液中降解纤维蛋白的酶体系。

本发明的有益效果：1、使血清产出率提高10％以上。2、使血清的平均分子量降低5-10％。3、使血清的粘滞度降低10％，平均每个滤芯过滤原料血清的极限量提高30％以上。

具体实施方式

结合实施例对本发明作进一步的描述。

实施例1