[发明专利]一种检测牛腺病毒3型的荧光定量PCR试剂盒及应用

权利要求书

1.一种检测牛腺病毒3型的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有：a)DNA 提取试剂，b)热启动Taq DNA聚合酶，c)引物和TaqMan探针，d)标准阳性 DNA模板，e)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列分别为正义引物： 5′-CCTGAATTCTCTTGCAGCCAGA-3′，反义引物： 5′-CCTACCGAACCGACGCAGAT-3′，扩增子大小为100bp，荧光探针序列为： 5′-FAM-TGAGAAGGTACTCCTCGTCGCTGGACCA-TAMRA-3′，探针的5′端标 记荧光发射基团FAM，3′端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由 已插入腺病毒3型pol蛋白100bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α， 增殖后提取质粒制备，并于紫外分光光度计测A₂₆₀定量并10倍梯度稀释。

2.根据权利要求1所述的一种检测牛腺病毒3型的荧光定量PCR试剂盒， 其特征在于：所述的PCR荧光定量反应液由10×buffer、10μM的正义引物和反 义引物、10μM的荧光探针和热启动Taq DNA聚合酶、无核酸酶的无菌水组成。

3.根据权利要求1所述的一种检测牛腺病毒3型的荧光定量PCR试剂盒， 其特征在于：所述的标准阳性模板DNA序列为：

CCGTAACCAGCACGTCCATAGCACAGTAGTCCAAGGTGCGTTGCACAATAT

CATAGGCACCTGAATTCTCTTGCAGCCAGAGACTCTTATTGAGAAGGTACT

CCTCGTCGCTGGACCAGTAGTCCCTCTGAGGAAAAGAATCTGCGTCGGTTC

GGTAG。