[发明专利]一种利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法

权利要求书

1、一种利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法，其特征在于：

(1)产酶用混合固体料液制备：麦麸6-100kg；秸秆或锯末25-350kg；磷酸二氢钾1.5-33kg；硫酸铵1.8-21kg；硫酸镁0.56-5kg；氯化钴0.16-1.5kg；Tween 800.01-0.3kg与水50-1000kg混合后得到混合固体料液；

(2)接种：将绿色木霉和黑曲霉混菌种子液分别培养，按照绿色木霉∶黑曲霉混菌＝1∶1-3的比例接种到混合固体料液中，体积比，1亿个细胞数/ml，控制温度在60-70％，每隔4小时通风一次；

(3)复合纤维素酶系提取：接种培养5天后从固体料曲中提取复合纤维素酶系，控制酶系中内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶的比例以干物质为基准为6-10∶1-4∶1-4；

(4)葡萄糖和纤维二糖制备：在得到的复合纤维素酶系中添加纤维素酶激活剂，以酶的质量计，纤维素酶激活剂加入量为10-500mg/kg，酶水解的pH值控制在4.5-5.0，温度控制在45-60℃，木质纤维素类生物质的固体含量以质量比计为25-35％，搅拌转速50-200rpm，酶解时间控制在60-72小时，得到葡萄糖和纤维二糖。

2、根据权利要求1所述的利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法，其特征在于：所述木质纤维素类生物质是麦杆、稻杆、速生林以及环境和生物中废弃的富含纤维素的生物质，生物质含有植物干重的20-70％的纤维素和10-40％的半纤维素，以及部分木质素。

3、根据权利要求1所述的利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法，其特征在于：所述的纤维素酶激活剂的组分包括含有金属离子的盐类和表面活性剂。

4、根据权利要求3所述的利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法，其特征在于：所述的金属离子是第一副族Cu²⁺、第二副族Zn²⁺、第七副族Mn²⁺和第八副族Fe²⁺、Fe³⁺、Co²⁺或Ni²⁺。

5、根据权利要求3所述的利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法，其特征在于：所述的表面活性剂主要是十六烷基三甲基溴化铵CTAB、十二烷基磺酸钠SDS、聚乙二醇对异辛基苯基醚x-100、聚氧乙烯月桂醚Brij3、吐温20和吐温80以及聚乙二醇PEG系列。

6、根据权利要求5所述的利用纤维素复合酶系生产葡萄糖和纤维二糖的方法，其特征在于：所述的聚乙二醇PEG为PEG2000，PEG4000和PEG6000。