[发明专利]一种神经生长因子海绵剂及其制备方法

权利要求书

1、一种神经生长因子海绵剂，其特征在于，该海绵剂包括0.01～2％ 重量百分含量的神经生长因子和胶原海绵或明胶海绵基质，所述神经 生长因子经醛类交联剂交联固定在胶原海绵或明胶海绵基质上。

2、根据权利要求1所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述胶原海绵或明胶海绵基质中含有：

85～99％所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白或明胶；

0.3％～9％所述海绵剂重量百分含量的蛋白保护剂；

0.5％～5％所述海绵剂重量百分含量的增塑剂。

3、根据权利要求1所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述醛类交联剂为甲醛、多聚甲醛或戊二醛。

4、根据权利要求1或2所述一种神经生长因子海绵剂，其特征 在于，所述神经生长因子为动物源性神经生长因子或采用基因工程重 组技术制备的神经生长因子。

5、根据权利要求4所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述动物源性神经生长因子为人胎盘神经生长因子、小鼠颌下腺神经 生长因子或蛇毒神经生长因子。

6、根据权利要求4所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述采用基因工程重组技术制备的神经生长因子为重组人神经生长 因子或重组鼠神经生长因子。

7、根据权利要求2所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述蛋白保护剂为人血白蛋白或牛血清白蛋白。

8、根据权利要求2所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述增塑剂为甘油或聚乙二醇。

9、根据权利要求8所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述聚乙二醇为聚乙二醇1000、聚乙二醇4000、或聚乙二醇6000。

10、根据权利要求2所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述胶原蛋白为采用以下方法制备的：

(1)取猪腿、牛腿或马腿的肌腱，去除表皮层、脂肪等杂质， 切片后用冷纯化水清洗干净；

(2)用20％氯化钠浸泡洗涤2～3次脱脂、去血清等杂质；

(3)溶于30～60倍体积的1％乙酸溶液中，加入终浓度为0.4％ 的胃蛋白酶，37℃搅拌消化1小时后，2～8℃放置继续消化5～10天；

(4)将消化液离心，收集上清，加入NaCl至终浓度为2mol/L， 2～8℃沉淀过夜，收集沉淀；将沉淀重溶于0.1～1％乙酸溶液中，离心 收集上清，加入NaCl至终浓度为1～2mol/L，2～8℃沉淀过夜，收集 沉淀，即得胶原蛋白。

11、根据权利要求2所述一种神经生长因子海绵剂，其特征在于， 所述明胶为市售医用明胶。

12、一种制备权利要求2所述神经生长因子海绵剂的制备方法， 其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)将胶原蛋白或明胶溶于0.1％～1％乙酸溶液中，制成0.1～3％ 胶原蛋白或明胶溶液，于0.2～2mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4～8.0) 中透析至中性；

(2)在上述胶原蛋白或明胶溶液中，加入神经生长因子、蛋白 保护剂和增塑剂，使最终各组份重量百分含量分别为：神经生长因子 0.01～2％，胶原蛋白或明胶85～99％，蛋白保护剂0.3％～9％，增塑剂 0.5％～5％，于-80～-20℃冷冻2～5天，冻干得到海绵状材料；

(3)将上述海绵状材料置于气体发生器中，30～45℃下用醛类交 联剂熏蒸交联固定1～24小时；

(4)切割，真空包装，灭菌、灭病毒，制得神经生长因子海绵 剂成品。