[发明专利]一种L-色氨酸的发酵生产工艺

权利要求书

1.一种L-色氨酸的发酵生产工艺，其特征在于包括下述步骤：

(1)种子制备：

a、首先将母种谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)接入装有斜面培养基的斜面试管中，于28～30℃培养55～72h，制得斜面试管菌种；

b、然后再将步骤a的斜面试管菌种接入种子培养基中进行斜面活化，于28～30℃培养18～24h，制备成摇瓶种子；

c、将步骤b的摇瓶种子接入装有摇瓶培养基的摇瓶中，于22～26℃，以250～300转/分的转速培养24～48h，成为一级种子；

(2)发酵生产工艺：

将步骤(1)c的一级种子按体积比计，以0.1～1％的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中发酵，发酵前12h通气量要小，风量按1∶0.5～0.8vvm，12h后逐渐加大，最后风量达到1∶1.5vvm，发酵过程中，温度控制在22～26℃，罐压保持在0.05～0.07Mpa，pH值控制在6.0～6.1，通过不断加料，维持碳、氮平衡，经过45～60h后发酵培养成熟；

其中，步骤(1)a中斜面培养基的组成为：葡萄糖15g、琼脂粉20g、酵母粉0.08g、KH₂PO₄ 2.6g、水1000ml，灭菌前pH值8.0～8.2；

步骤(1)b中种子培养基和步骤(1)c中摇瓶培养基的组成为：葡萄糖15g、酵母粉0.08g、KH₂PO₄ 5.6g、MgSO₄·7H₂O 4.6g、MnSO₄ 0.0013g、水1000ml，灭菌前pH值8.0～8.2；

步骤(2)中发酵培养基的组成为：葡萄糖85g、酵母粉0.05g、硫胺素0.0013g、柠檬二酸钠1.6g、(NH₄)₂SO₄ 4.2g、KH₂PO₄ 5.6g、MgSO₄·7H₂O 4.6g、MnSO₄ 0.0013g、水1000ml，灭菌前pH值8.0～8.2。

2.如权利要求1所述的L-色氨酸的发酵生产工艺，其特征在于：步骤(1)c中，接种量按体积比计为0.5～1％。

3.如权利要求2所述的L-色氨酸的发酵生产工艺，其特征在于：步骤(2)中，利用计量泵，双路进料，一路进糖、一路进氮，保持发酵罐里碳、氮平衡。

4.如权利要求3所述的L-色氨酸的发酵生产工艺，其特征在于维持碳、氮平衡的具体操作为：发酵前12h，补糖的流量为120l/h，12h以后变为150l/h，补氨水量根据发酵液pH值进行调节，总体维持碳、氮平衡。