[发明专利]一种核果类经济林砧木的组织培养方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种核果类经济林砧木的快速繁殖技术，特别是一种核果类经济林砧木的组织培养方法，它适用于对核果类经济林砧木进行快速繁殖。

背景技术：

核果类经济林主要隶属于蔷薇科和鼠李科等，生产中多采用无性繁殖方法繁殖苗木。核果类经济林主要的繁殖方法包括嫁接繁殖、扦插繁殖、根蘖繁殖和组织培养等。其中嫁接繁殖技术繁殖迅速、成活率高、技术易于掌握和推广、结果早，在核果类经济林良种苗木繁育方面的应用最为普遍。而在繁殖嫁接苗时，不同砧木对栽培品种生长和结果的影响较大，选择适宜的砧木品种，可以有效地提高栽培品种的产量、质量甚至抗性。

我国目前在核果类经济林苗木生产中普遍使用的砧木为原产我国的山桃(Prunus davidiana)、毛桃(P.persica)、山杏(Ameniaca sibirica)、山樱桃(P.serrulata)、毛樱桃(P.tomentosa)等，这些砧木品种在生产应用过程中不同程度的表现出抗性差，适生范围相对较窄，与栽培品种亲和力差，出现“大脚”现象或“小脚”现象、寿命短等缺陷。特别是这些砧木品种对流胶病和根癌病的抗性较弱，在我国，核果类经济林特别是桃、李、杏的主要产区流胶病和根癌病发生普遍，在一些品种上发生十分严重，使果品产量低，品质差，树体逐步衰弱，甚至死亡。这严重制约着核果类经济林产业健康、持续稳定的发展。

世界各国对优良核果类经济林砧木品种的选育都非常重视，尤其是美国等其它国家，优良核果类砧木品种培育的系统研究工作已经开展了50～80年，他们已经培育出了大量优良砧木品种。一些砧木品种如VIKEN、NAPLEB、CRUT、MAPARD等具有显著的抗流胶病和根癌病特性，并且对栽培品种的生长结果具有良好的促进作用。

但是，由于繁殖材料的限制，目前这些优良的核果类砧木品种在我国还不能进行大面积繁殖，严重影响了核果类优良砧木品种的繁殖，也严重阻碍了李、杏、杏李、桃、樱桃等核果类经济林的健康发展。因此，研究优良核果类砧木的组织培养繁殖技术，快速繁殖优良核果类砧木，对提高我国核果类经济林品种的质量和产量十分重要。

发明内容：

本发明的目的是针对核果类经济林砧木的快速繁殖，而研究出一种核果类经济林砧木的组织培养方法。该方法是采取核果类经济林砧木带腋芽的茎段，通过芽诱导培养基、增殖培养基培养出大量(数百倍于原材料的)丛生芽，然后通过生根培养基将这些丛生芽培养成完整植株。从而在大约半年时间内生产出数百倍于原材料数量、生长一致、完全保持原植株优良性状的核果类经济林砧木苗木，以满足市场需求。

本发明是这样实现的：一种核果类经济林砧木的组织培养方法：材料是取核果类经济林砧木品种，其中，核果类经济林砧木的组织培养方法包括以下步骤：第一步、采核果类经济林砧木新品种VIKEN、NAPLEB、CRUT、MAPARD带腋芽的茎段作为外植体，用清水洗净，放在超净工作台上，先用75％的酒精消毒6～8秒，无菌水冲洗三次，再用0.1％升汞消毒6～8分钟，无菌水冲洗三次；第二步、将灭菌后的外植体剪成0.5～1.5cm的茎段，植入芽诱导培养基中进行培养，培养条件为室温25～28℃，光照强度2000～5000lux，光照时间每天12小时，20天后植入增殖培养基中，进行增殖培养，培养条件同上，培养时间为30天；第三步、生根培养，切取约2～3cm高的核果类经济林砧木健壮苗，植入生根培养基，进行生根培养，培养条件同上，生根时间为40天；第四步、待核果类经济林砧木苗生根长至5～8cm时，洗净根部附着的培养基，移至无污染的红壤土或/和黄壤土中，用塑料薄膜覆盖保湿，保持75％～85％空气湿度，45天后移至大田，遮荫一周即可。

本发明可以是这样实现的：芽诱导培养基为：MS+2.0mg6-BA+0.5mgNAA，再加入琼脂6.0g/L，蔗糖30g/L，PH值为5.8，装瓶后高压灭菌15～20分钟。

本发明还可以是这样实现的：增殖培养基为：MS+(1.0～2.5mg)6-BA+(0.45～0.80mg)NAA，再加入琼脂6.0g/L，蔗糖30g/L，PH值为5.8，装瓶后高压灭菌15～20分钟。

本发明还可以是这样实现的：生根培养基为：MS+(0.8～1.2)mg IBA，再加入琼脂6.0g/L，蔗糖30g/L，PH值为5.8，装瓶后高压灭菌15～20分钟。

本发明的积极效果是：

1、通过本发明的实施，可以100％保持原植株基因型及其所有的优良特性。