[发明专利]结核分枝杆菌快速检测的方法无效
申请号: | 200910065180.0 | 申请日: | 2009-06-12 |
公开(公告)号: | CN101570777A | 公开(公告)日: | 2009-11-04 |
发明(设计)人: | 娄斌;付光宇;张国龙;安维;庄兆虹;罗江卫;张文星;孙虎;苗拥军;吴学炜 | 申请(专利权)人: | 郑州安图绿科生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;G01N21/76;C12R1/32 |
代理公司: | 郑州异开专利事务所(普通合伙) | 代理人: | 王 霞 |
地址: | 450016河南省郑州市*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 结核 分枝杆菌 快速 检测 方法 | ||
1、一种结核分枝杆菌快速检测的方法,其特征在于:它包括下述步骤:
第一步,结核分枝杆菌噬菌体的重组:将5端用一个强启动子修饰的荧光蛋白基因和结核分枝杆菌启动子基因整合到结核分枝杆菌噬菌体内;
第二步,标本中结核分枝杆菌的富集:取患者痰标本,用2~5倍的消化液室温消化10~50分钟,在离心机内离心10~30分钟,去除上清液,用缓冲液稀释沉淀后备用;
第三步,用重组的噬菌体感染标本中的结核分枝杆菌:取第二步中处理后的标本置于容器内,同时用缓冲液做空白试验,向标本和缓冲液中分别添加第一步得到的经过重组的结核分枝杆菌噬菌体,37度温育1~6小时;
第四步,检测荧光强度:用荧光扫描仪在280~600nm波长下分别对标本和空白对照进行荧光强度对照检测即可。
2、根据权利要求1所述的结核分枝杆菌快速检测的方法,其特征在于:所述经过基因重组的结核分枝杆菌噬菌体为D29或L5。
3、根据权利要求1所述的结核分枝杆菌快速检测的方法,其特征在于:所述消化液为碱和N-乙酰-L-半胱氨酸混合液,二者重量之比为1000∶1~10。
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