[发明专利]与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记及其用法无效
申请号: | 200910065425.X | 申请日: | 2009-07-14 |
公开(公告)号: | CN101955985A | 公开(公告)日: | 2011-01-26 |
发明(设计)人: | 牛吉山;尹钧;马正强;贾海燕;王保勤;倪永静 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州中原专利事务所有限公司 41109 | 代理人: | 张绍琳 |
地址: | 450002*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 白粉病 基因 pmlk906 pm4 连锁 sts 标记 及其 用法 | ||
1.一种与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记,命名为XTaAetPR5-467,是由SEQ ID No.1所示的核苷酸序列和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的一对引物扩增。
2.权利要求1所述的与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记的用法,其特征在于:以待测小麦基因组DNA作为模板,以SEQ ID No.1所示的核苷酸序列作为引物1,以SEQ ID No.2所示的核苷酸序列作为引物2进行PCR扩增,检测扩增产物中是否有467bp片段特异带,能扩增出467bp片段特异带的单株携带抗病基因PmLK906,不能扩增出467bp片段特异带的单株不携带抗病基因PmLK906。
3.根据权利要求2所述的与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记的用法,其特征在于:所述PCR扩增反应体系PCR试剂组成为:
H2O 13.64μL
10×buffer(含Mg2+) 2.0μL
dNTP(25mmol/L) 1.6μL
引物1(10μmol/L) 0.8μL
引物2(10μmol/L) 0.8μL
Taq酶(20u/μL) 0.16μL
模板DNA(50ng/μL) 1.0μL
总体积 20.0μL,
PCR扩增程序为:先在94℃预变性4分钟;接35个循环的94℃变性30秒,52℃复性45秒,72℃延伸1分钟;最后在72℃延伸10分钟。扩增结束后将样品取出置于4℃保存待检测。
4.根据权利要求2或3所述的与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记的用法,其特征在于:所述检测扩增产物方法为扩增产物在1%的琼脂糖凝胶电泳上进行分离,然后用EB进行显色。
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