[发明专利]与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记及其用法无效

专利信息
申请号: 200910065425.X 申请日: 2009-07-14
公开(公告)号: CN101955985A 公开(公告)日: 2011-01-26
发明(设计)人: 牛吉山;尹钧;马正强;贾海燕;王保勤;倪永静 申请(专利权)人: 河南农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 郑州中原专利事务所有限公司 41109 代理人: 张绍琳
地址: 450002*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 小麦 白粉病 基因 pmlk906 pm4 连锁 sts 标记 及其 用法
【权利要求书】:

1.一种与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记,命名为XTaAetPR5-467,是由SEQ ID No.1所示的核苷酸序列和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的一对引物扩增。

2.权利要求1所述的与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记的用法,其特征在于:以待测小麦基因组DNA作为模板,以SEQ ID No.1所示的核苷酸序列作为引物1,以SEQ ID No.2所示的核苷酸序列作为引物2进行PCR扩增,检测扩增产物中是否有467bp片段特异带,能扩增出467bp片段特异带的单株携带抗病基因PmLK906,不能扩增出467bp片段特异带的单株不携带抗病基因PmLK906。

3.根据权利要求2所述的与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记的用法,其特征在于:所述PCR扩增反应体系PCR试剂组成为:

H2O                13.64μL

10×buffer(含Mg2+) 2.0μL

dNTP(25mmol/L)     1.6μL

引物1(10μmol/L)   0.8μL

引物2(10μmol/L)   0.8μL

Taq酶(20u/μL)     0.16μL

模板DNA(50ng/μL)  1.0μL

总体积             20.0μL,

PCR扩增程序为:先在94℃预变性4分钟;接35个循环的94℃变性30秒,52℃复性45秒,72℃延伸1分钟;最后在72℃延伸10分钟。扩增结束后将样品取出置于4℃保存待检测。

4.根据权利要求2或3所述的与小麦抗白粉病基因PmLK906和Pm4连锁的STS标记的用法,其特征在于:所述检测扩增产物方法为扩增产物在1%的琼脂糖凝胶电泳上进行分离,然后用EB进行显色。

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