[发明专利]卷柏降血糖和调血脂成分的制备方法及其新用途

说明书

技术领域

本发明涉及卷柏的新用途，即卷柏经溶剂提取、大孔树脂和聚酰胺串联柱层析分离纯化得到卷柏总黄酮及穗花杉双黄酮单体成分。确切的说是从卷柏中提取的卷柏总黄酮及穗花杉双黄酮单体成分在制备降血糖(α-葡萄糖苷酶抑制剂)和调血脂方面的应用。也涉及该药物的药物制剂。属于医药技术领域。

背景技术

卷柏系卷柏科卷柏属(Selaginella)植物垫状卷柏S.pvlvinata(Hook.et Gev.)Maxim、卷柏S.tamariscina(beav.)spring和江南卷柏S.moellendorfii Hieron的干燥全草。卷柏属植物具有防癌治癌、抗炎、抗病毒、镇痛、降血压、降血糖、抗痛风和增强人体免疫功能等作用(国外医学植物药分册，2002年报17卷3期97-99页)，特别是含有丰富的双黄酮类成分是该属植物的一大特征。到目前为止还未发现有比卷柏属植物含有双黄酮更高的植物。在以往的研究已报道了，从卷柏中提取穗花杉双黄酮提取物的生产工艺(200410048613.X)，是一种较粗的提取物，在化妆品方面的用途。郑晓珂等报道卷柏水提取和正丁醇提取部分有雌激素样的作用(200610017494.X)。李方莲、吴奕富分别报道了卷柏粗提取物或含有卷柏的复方针剂对实验大鼠有降血糖的作用，但均为粗提取物，没有经过纯化，没有明确主要有效成分。康文艺等报道了用碱提取酸沉淀法制备了卷柏中的酸性部位，其中穗花杉双黄酮含量仅为10-12％，尚有90％左右的其他成分不清楚，实验报道了该酸性提取物具有α-葡萄糖苷酶抑制剂作用和降血脂的作用(精细化工，2008年12月，第25卷，第12期)，该提取物仍然是一种非常复杂的混合物，不能确定其有效成分是什么。赵全成等利用大孔树脂和C-18反相柱等方法从卷柏中分离纯化了卷柏总黄酮和单体成分穗花衫双黄酮，并证明从卷柏中提取的总黄酮和穗花杉双黄酮单体成分具有预防和治疗老年痴呆的作用(200810050894.X)。

我们通过卷柏提取的总黄酮和穗花杉双黄酮单体成分的进一部研究证明卷柏总黄酮和穗花杉双黄酮单体成分具有α-葡萄糖苷酶抑制作用，降血糖和调血脂作用。

α-葡萄糖苷酶抑制剂是通过竞争性抑制α-葡萄糖苷酶的活性，可阻滞双糖水解为单糖，延缓糖的吸收，使血糖平稳并缓慢的维持在一定的水平，防治餐后高血糖症，同时还可以提高糖耐量，预防和治疗肥胖症，高脂血症，用于治疗应碳水化合物紊乱而引起的疾病。

本发明的特点在于卷柏用乙醇或甲醇提取后提取液不浓缩直接上大孔树脂柱，操作简单，并且解决了浓缩后有效成分部分析出，溶液浑浊不利于上柱的问题。并且与聚酰胺串联后吸附纯化，得到的卷柏总黄酮含量高。二次经过聚酰胺柱纯化后穗花杉双黄酮纯度高；此方法没有利用硅胶柱层析，高效液相色谱制备，整个生产工艺简单、生产周期短，安全、不污染环境，成本低，收率高，纯度高达95％以上，特别适合产业化大量生产。

本发明完成前未发现有关卷柏总黄酮及其穗花杉双黄酮作为α-糖苷酶抑制剂、在预防和治疗降血糖及调血脂方面应用的报道。本发明具有广泛的应用前景。

穗花杉双黄酮(amentofeavone)的结构：

发明内容

本发明的目的之一是提供穗花杉双黄酮和卷柏总黄酮具有抑制α-葡萄糖苷酶的活性，用于治疗和预防高血糖及高血脂症。具体的说是穗花杉双黄酮和卷柏总黄酮用于制备防治高血糖、高血脂药物的新用途。经动物试验，本发明的制剂具有显著抑制α-葡萄糖苷酶的活性；能延缓正常小鼠餐后血糖升高、能延缓四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠餐后血糖升高；降低四氧嘧啶高血糖小鼠的血糖；降低正常小鼠血糖，促进胰岛素分泌，减少胰高血糖素含量，增加肝糖原、肌糖原含量。在本发明申请前未见有应用卷柏总黄酮及其穗花杉双黄酮单体成分预防和治疗高血糖、高血脂症的报道。

本发明目的之二是提供了卷柏总黄酮及其穗花杉双黄酮单体成分的提取分离方法，以往公开的提取分离卷柏总黄酮和单体穗花杉双黄酮的方法多是以石油醚脱脂和除叶绿素等脂溶性杂质或仅限于实验室的分离，不适合产业化生产。本发明采用了大孔树脂柱和聚酰胺柱串联的方法纯化卷柏总黄酮和穗花杉双黄酮，可操作性强，适合工业生产。本发明首次采用了乙醇或甲醇提取卷柏的提取液不经过浓缩，直接在大孔树脂上吸附纯化，解决了乙醇或甲醇提取液浓缩后部分有效成分析出药液混浊，不利于在大孔树脂柱和聚酰胺柱上吸附纯化的问题。也是本发明的创新点之一。大孔树脂柱串联聚酰胺柱吸附纯化，可以得到含量较高的卷柏总黄酮。