[发明专利]一种乳酸乳球菌诱变菌株及其培育方法有效
| 申请号： | 200910067452.0 | 申请日： | 2009-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN102093962A | 公开（公告）日： | 2011-06-15 |
| 发明（设计）人： | 滕利荣;任晓冬;姜丽艳;孟庆繁;逯家辉;马富强;王贞佐;程瑛琨;兰鹏飞;李雪 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/01;C12R1/01 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130012 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳酸 球菌 诱变 菌株 及其 培育 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种乳酸乳球菌诱变菌株，其保藏号为：CGMCC NO.3050。
2.获得权利要求1所述乳酸乳球菌菌株的方法，包括以下步骤完成：
1)将Lactococcus lactis subsp.lactis ATCC11454冻干粉末接入液体小试管培养基中进行活化后，转接至液体摇瓶培养基中，30-38℃恒温箱中培养8-24h，连续传代5次后，接种新的种子液，接种量为5％(v/v)，装液量为100mL(摇瓶容量250mL)，将培养8h的菌液，8000r/min离心10min，菌体用无菌水清洗两遍，加一定体积水，在有玻璃珠的三角瓶中30℃振荡1h，用血球计数板进行计数后，8000r/min离心10min，取菌体沉淀；
2)在菌体沉淀中加入1％-3％(v/v)的0.1mol/L的硫酸二乙酯磷酸盐缓冲液(调节使菌体浓度为1×108个/mL)，pH 7.0，放入150r/min摇床振摇15-40min；
3)采用25％硫代硫酸钠进行终止诱变反应，将诱变菌液逐级稀释至1×106倍，涂布乳链菌肽抗性梯度平板，30-38℃恒温箱中培养8-24h，对乳链菌肽高产菌株进行初筛，采用双层琼脂扩散法进行复筛；
4)将筛选获得的菌株在摇瓶中复苏，30℃，150r/min恒温摇床中培养8-24h，连续传代10次，即得。
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