[发明专利]以硅凝胶为载体的固定化青霉素酰化酶及制备方法

权利要求书

1.以硅凝胶为载体的固定化青霉素酰化酶的制备方法，其特征在于依步骤如下：

(1)载体制备：将质量分数30％酸性硅溶胶溶于乙醇中，室温搅拌状态下加入硅烷偶联剂，三者体积比为1∶1∶1～1.5，室温凝胶3～24小时，机械搅拌粉碎凝胶块，乙醇冲洗，大量去离子水冲洗，4～7℃保存；

(2)载体活化：将上述湿的载体，加入到质量分数2％～10％的活化交联剂中，室温搅拌4-24小时，离心分离，蒸馏水洗涤，4-7℃保存；

(3)将步骤(2)中的湿的活化的载体的重量与青霉素酰化酶酶液体积按1∶1～1∶4g/mL的比例，加入到10-20ml的pH为7.6～8.1的0.1～0.25M的磷酸盐缓冲液中，室温低速搅拌12～24小时，产物用相同条件下的磷酸盐缓冲液冲洗，4～7℃保存。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在所述的硅烷偶联剂包括γ-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)、γ-(2，3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷、N-β(氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷或γ-氯丙基三乙氧基硅烷。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在所述的活化交联剂包括：戊二醛、N，N-碳酰二咪唑、溴化氰或1，4-二缩水甘油醚。