[发明专利]杀灭线虫菌制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种杀灭线虫的菌制剂，其特征在于：该菌制剂由巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)和细黄链霉菌(Staestomyces microflavus)优化组合组成的复合菌群，其中各菌菌落数比例是1∶0.5～1∶1～1.5，吸附载体为腐殖酸。

2.如权利要求1所述的杀灭线虫的菌制剂的制备方法，其特征在于它包括下述步骤：

1)将保存的巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)、荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)和细黄链霉菌(Staestomyces microflavus)斜面菌种活化，分别摇瓶培养；基本培养基：可溶性淀粉培养基培养，具体配方如下：可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0.5g，K₂HPO₄ 0.5g，MgSO₄.7H₂O 0.5g，FeSO₄ 0.01g，蒸馏水1000mL，pH7.0～7.2，0.1Mpa，121℃高压灭菌20～30min；28～30℃培养12～24h；

2)将各菌群混合，二级液体扩大培养，总体积5～20L，以玉米面代替可溶性淀粉培养基中的可溶性淀粉，并添加重量百分比0.1％的腐殖酸，其他成分和比例与可溶性培养基相同，接种量体积百分比为5％～10％，28～30℃培养12～24h；菌群密度为5×10⁸/mL-8×10⁸/mL；

3)再三级液体扩大培养，总体积10倍于2)，扩大培养基同2)，接种量体积百分比为5％～10％，28～30℃培养12～24h；菌群密度为1×10⁹/mL-9×10⁹/mL；

4)以腐殖酸为载体将混合菌群均匀吸附、固定化于腐殖酸上，腐殖酸与的步骤3)的扩大培养液重量比为3~5，菌群密度为2×10⁸/mL-3×10⁹/mL。