[发明专利]一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法

说明书

(一)技术领域：

本发明涉及一种微囊化的酶制剂的制备方法，特别是一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法

(二)背景技术：

碱性蛋白酶是指pH值在碱性范围内水解蛋白质肽键的酶类，最适pH一般为9～11，因此，可以在碱性条件下保持良好的活力，并催化蛋白水解，在加酶洗涤剂、制革、丝绸、饲料、食品、医药等工业有广泛的应用。是单酶中全球用量最大的产品。

生物酶制剂主要以三种形式供给，分别为液体酶、粉末状酶和颗粒酶。目前，国内固体酶制剂主要以粉剂为主，随着现代科学技术和生产力迅速发展，粉尘对人体的危害已越来越受到人们的关注，对于粉尘所引起的人体病理改变和临床表现的研究正方兴未艾。粉尘可给人体带来多种危害，可引起上呼吸道黏膜的炎症(包括慢性鼻炎、慢性咽炎和慢性扁桃体炎)、尘源性支气管炎、职业性哮喘外等。

碱性蛋白酶的微胶囊化可有效降低粉尘污染，提高碱性蛋白酶制剂的使用安全性，提高使用配伍性，延长酶的半衰期，为酶制剂的微胶囊化提供可行性依据。

(三)发明内容：

本发明的目的在于针对上述问题，提供一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法。本发明的工艺路线具有工艺简单、降低粉尘污染，提高使用安全性，提高使用配伍性，延长酶的半衰期，为酶制剂的微胶囊化提供可行性依据。

本发明的技术方案：

菌种改造→发酵→产酶→絮凝→板框过滤→微滤→超滤、浓缩→盐析→板框过滤→酶泥微波干燥→研磨→微囊化→筛分

一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法，由通过离子注入改造的嗜碱芽孢杆菌经过发酵、絮凝、板框过滤、微滤、超滤、盐析、板框过滤、微波干燥、研磨、微囊化、筛分制得微囊化的高活力高碱性蛋白酶，其特征在于：经盐析、板框过滤后所得到的酶泥含水量为35％-40％，微波干燥选用微波回转真空干燥机，温度40-50℃，真空度-0.09-0.10，干燥时间20-25min。

一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法，其特征在于：在微囊化工艺中，将乙基纤维素和PEG-6000溶于乙醇中，混合均匀得壁材成膜溶液。乙基纤维素的添加量为3％-5％，PEG-6000添加量为5％-7％。

一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法，其特征在于：在微囊化工艺中，将微波干燥、研磨后的酶粉悬浮于流化床上，物料温度40-50℃；15分钟以内喷雾的形式将壁材成膜溶液喷入流化床中，干燥成膜温度65-75℃，分筛，分别过60目-100目筛，得到不同活力的微囊化的高活力高碱性蛋白酶。

本发明的优越性在于：1、有效降低粉尘污染，提高使用安全性2、工艺简单，生产周期短；3、提高使用配伍性，延长酶制剂的半衰期；4、成本合理，为酶制剂的微胶囊化提供可行性依据。

(四)具体实施例：

实施例1：

一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法，由通过离子注入改造的嗜碱芽孢杆菌经过发酵、絮凝、板框过滤、微滤、超滤、盐析、板框过滤得到含水量35％的酶泥，选用微波干燥回转真空干燥机，温度45℃，真空度-0.094，干燥时间20min，研磨制得酶粉；

将乙基纤维素和PEG-6000溶于乙醇中，混合均匀得壁材成膜溶液。乙基纤维素的添加量为3％，PEG-6000添加量为5％；

将制得的酶粉悬浮于流化床上，物料温度45℃；15分钟以内喷雾的形式将壁材成膜溶液喷入流化床中，干燥成膜温度70℃，分筛，过100目筛，得到微囊化的高活力高碱性蛋白酶。

实施例2：

一种微囊化的高活力高碱性蛋白酶的制备方法，由通过离子注入改造的嗜碱芽孢杆菌经过发酵、絮凝、板框过滤、微滤、超滤、盐析、板框过滤得到含水量40％的酶泥，选用微波干燥回转真空干燥机，温度48℃，真空度-0.094，干燥时间20min，研磨制得酶粉；

将乙基纤维素和PEG-6000溶于乙醇中，混合均匀得壁材成膜溶液。乙基纤维素的添加量为4％，PEG-6000添加量为6％；

将制得的酶粉悬浮于流化床上，物料温度40℃；15分钟以内喷雾的形式将壁材成膜溶液喷入流化床中，干燥成膜温度70℃，分筛，过80目筛，得到微囊化的高活力高碱性蛋白酶。