[发明专利]传染性羊痒病抗性基因快速分型检测试剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于动物疾病检测领域，尤其是一种以包含决定羊痒病抗性/敏感性的羊朊蛋 白编码基因PRNP的第136、154和171位密码子为靶目标设计的生物制剂，借助实时荧 光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR)检测体系及其之后的终点读板 模式，对PRNP的第136、154和171位密码子进行检测，用来判定被检测羊是否含有传 染性羊痒病抗性基因，即一种传染性羊痒病抗性基因快速分型检测试剂及其制备方法和 应用。

背景技术

羊痒病(scrapie)俗称“瘙痒病”，属于传染性海绵状脑病(Transmissible spongiform encephalopathies，TSEs)的一种，是由羊痒病朊病毒引起成年绵羊和山羊 的一种慢性进行性的、致死性神经系统疾病(Stanley B Prusiner.The Prion Diseases. Scientific American，1995，48-57)。瘙痒是痒病的一个显著特征，也是其名字的来 源。此外，共济失调、麻痹、衰弱、震颤、姿势不稳、痴呆、知觉过敏、行为异常等神 经症状也是其主要的临床症状，死亡率达100％。组织病理学病变局限于神经系统，以神 经元空泡化，灰质海绵状病变，神经元丧失，神经胶质和星状细胞增生，病原因子PrPsc 蓄积和淀粉样蛋白斑块形成为特征，病变通常为两侧对称(Aguzzi A，Heppner FL. Pathogenesis of prion diseases：a progress report.Cell Death and Differentiation. 2000，7：889-902；Combrisson H，Robasine G，BRUGERE，etal.Urodynamic parameters in scrapie-afected ewes and their modifications in the course of the disease. Neurourology and rodynamics.1998，17：555-563)。

羊痒痒病迄今已有270多年的历史记载，是最早所知的传染性海绵状脑病，多发于 绵羊和山羊，目前在世界许多地方流行。本病最早于18世纪发生于英格兰，以后陆续传 入比利时、法国、德国、西班牙、南非、印度、冰岛、澳大利亚、新西兰、加拿大和美 国。病原主要定位于中枢神经系统、脾脏和淋巴结中。不同品种、性别的绵羊和山羊均 可发病，但以美国萨福克种羊的敏感性较高。该病通常发生于病羊污染牧地中放牧的羊 群。以2～4岁的羊多发。可通过直接接触和间接接触感染。感染母羊的胎盘组织中含有 病原，因此也可通过胎盘垂直传播。患病母羊和公羊的后代，其痒病的发病率较高。

本病除羊尸体消瘦和皮肤损伤外没有肉眼可见的病变，其诊断主要依靠临症状观察 与病理组织学检查进行确诊。此外，本病还可通过病羊的肉骨粉等传染给牛，而使牛感 染为疯牛病。人食用了被疯牛病病原污染的食品，可感染上传染性海绵状脑病——新变 异型克雅氏病(即nvCJD)。因此，羊痒病的诊断是根除和控制疯牛病、克雅氏病的关键。