[发明专利]狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种生物免疫制品，特别是涉及一种能同时预防人狂犬病及破伤风的双效价免疫球蛋白及其制备方法。

背景技术

狂犬病是一种病原体为核糖核酸型的弹性病毒。世界卫生组织统计，全球三分之二以上的国家和地区有狂犬病流行，我国及东南亚地区处于世界狂犬病高发区，其病例约占全球的70％以上。狂犬病一旦发病，目前尚无法医治，死亡率几乎达100％。根据WHO推荐的狂犬免疫接种方案，对暴露者注射人狂犬病免疫球蛋白(RIg)，然后肌肉注射狂犬病疫苗，以确保暴露者免疫效果。该方法被世界卫生组织公认为是目前唯一有效的预防方法。

破伤风是一种严重威胁人类生命健康的急性特异性感染疾病，由破伤风杆菌侵入人体伤口、生长繁殖、产生毒素引起。破伤风杆菌及其毒素不能侵入正常的皮肤和粘膜，故破伤风都发生在伤后。一切开放性损伤均有发生破伤风的可能。人体破伤风免疫球蛋白(TIg)是经乙肝疫苗接种后再经破伤风类毒素(TD)免疫的具有高效价破伤风抗体的血浆，经低温乙醇法分级沉淀、加压过滤分离提纯，并经病毒灭活处理，用于防治破伤风。

世界卫生组织要求，在对病犬咬伤积极预防狂犬病的同时，也应预防破伤风。目前我国临床使用的狂犬病人免疫球蛋白和破伤风人免疫球蛋白均为单一效价，使用时需要多次注射，临床使用不便，而且费用高。制备一种即能预防狂犬病同时又能预防破伤风发生的双效价免疫球蛋白，将会有较大的社会效益和经济效益。

发明内容

本发明的目的在于弥补现有技术及产品效能的不足，提供一种即能预防狂犬病同时又能预防破伤风发生的双效价免疫球蛋白及制备方法。

本发明提供的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白含有高效价的狂犬病抗体及破伤风抗体，其免疫球蛋白纯度不低于总蛋白含量的92％；狂犬病抗体效价不小于100IU/ml，破伤风抗体效价不小于60IU/mL；蛋白质含量不大于175g/L。

本发明提供的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白仅与抗人的血清产生沉淀线，与抗马、抗牛、抗猪、抗羊的血清均不产生沉淀线。

本发明提供的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白与正常人血清比较，主要沉淀线应为IgG，且其IgG单体及二聚体的含量之和不低于92％。

本发明将狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白制成常规的液体型或冻干剂型使用。

本发明的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白的制备方法是将双效价原料血浆经常规的低温乙醇蛋白分离法分级沉淀，提取免疫球蛋白组分，经加压过滤、离心、病毒灭活处理等必要的工序制成免疫球蛋白液体或冻干剂型。其制备方法的关键在于原料血浆的制备，具体方法是：

1)选择身体健康，符合血液制品原料血浆规定要求的供血浆者接种狂犬病疫苗，至少15天后再应用吸附破伤风疫苗进行免疫接种；

2)以固相酶联免疫法(ELISA)定量检测原料血浆的狂犬病抗体及破伤风抗体，单一血浆的狂犬病抗体效价不低于6IU/mL，破伤风抗体效价不低于5IU/mL，其它符合“血液制品原料血浆规程”要求，采集为狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白原料血浆；

3)混合采集的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白原料血浆，混合后血浆的狂犬病抗体效价不低于10IU/mL，破伤风抗体效价不低于8IU/mL。

本发明采集得到的原料血浆应低温冰冻储存，其保存期不超过2年。作为制备狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白原料的混合原料血浆，每批次需由不少于100名供血浆者的原料血浆混合而成。

本发明的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白可用于被狂犬或其他疯动物咬伤或抓伤暴露患者的免疫。其使用量以狂犬病抗体效价计，按20IU/kg体重计算，一次注射。如个体所需免疫球蛋白注射总剂量大于10mL时，可在1～2日内分次注射。随后即可进行狂犬病疫苗的注射。

本发明提供的狂犬病、破伤风双效价人免疫球蛋白一次注射即可预防狂犬病和破伤风，使用简单方便，具有较大的社会效益和经济效益。本发明免疫球蛋白的原料血浆制备方法简单，免疫球蛋白制备成本低。

具体实施方式

实施例1

1、供血浆者的免疫：

选择身体健康，符合血液制品原料血浆规定要求的供血浆者，在0、3、7、14、28天分别接种狂犬病疫苗2、2、1、1、2剂。接种狂犬疫苗30天后，再应用吸附破伤风疫苗，接照0、14、28天剂量不小于0.5mL进行免疫接种，并建立详细的免疫记录。

2、供血浆者的血浆筛选采集：