[发明专利]一种定量检测食品中恩诺沙星含量的试剂盒及其应用

权利要求书

1、一种定量检测食品中恩诺沙星的含量的试剂盒，包括标准品、辣根过氧化物酶(HRP)标记的恩诺沙星抗原、恩诺沙星特异性抗体、纳米磁颗粒分离剂、发光底物液和洗液。

2、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述标准品是由基质浓度为0.05M的磷酸盐缓冲液PBS，加恩诺沙星标准品抗原倍比稀释而成。

3、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述辣根过氧化物酶(HRP)标记的恩诺沙星抗原，加入保护剂。

4、根据全力要求3所述的试剂盒，其特征在于所述的保护剂包括浓度为0.05摩尔的磷酸盐缓冲液和0.2wt％牛血清白蛋白。

5、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述恩诺沙星特异性抗体为兔抗恩诺沙星多克隆抗体。

6、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述纳米磁颗粒分离剂为羊抗兔IgG抗体偶联的纳米磁颗粒。

7、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述洗液为含1wt‰吐温的磷酸盐缓冲液。

8、根据权利要求1-7中任一权利要求所述的试剂盒，其特征在于所述发光底物液包括A液和B液，其中：

A液：2wt％ Na₂CO_3·H₂O，0.95wt％ NaHCO₃，0.4wt％NaOH，0.4wt％EDTA加少量双蒸水于烧杯中55℃水浴溶解，然后加入鲁米诺(luminol)溶解，用重量百分比浓度为30％ NaOH和固体NaHCO₃调节PH至11.00左右，混合均匀；

B液：重量百分比浓度为30％H₂O₂，尿素1g于烧杯中溶解，混合均匀；

使用时将A液与B液按1:1的比例混合。

9、利用权利要求1所述试剂盒进行食品中恩诺沙星的定量检测，包括如下步骤：

a、样品的前处理；

b、取步骤a处理好的样品溶液、标准品、与辣根过氧化物酶(HRP)标记的恩诺沙星抗原，恩诺沙星特异性抗体各50uL，混匀37℃温育1小时；

c、加入纳米磁颗粒分离剂50uL/管，孵育5分钟；

d、外加磁场沉淀，去除上清，用洗液洗涤沉淀复合物；

e、加入发光底物液100uL/管，检测发光强度值；

f、根据恩诺沙星浓度与发光强度成一定比例关系，得出恩诺沙星浓度。