[发明专利]表达促凋亡基因的靶向增殖的重组腺病毒及其应用无效
申请号: | 200910077912.8 | 申请日: | 2009-02-03 |
公开(公告)号: | CN101497876A | 公开(公告)日: | 2009-08-05 |
发明(设计)人: | 阮国瑞;谢敏;马大龙;钱其军;黄晓军;陈珊珊;吴红平;李琳芳;常艳;牛继红;李金兰 | 申请(专利权)人: | 北京大学人民医院 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/85;A61K48/00;A61P35/00;A61P35/02;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关 畅;任凤华 |
地址: | 100044北京市西城区西直门南大街1*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达 促凋亡 基因 靶向 增殖 重组 病毒 及其 应用 | ||
1.包括PDCD5基因表达盒的重组腺病毒,所述PDCD5基因表达盒自上游至下游依次包括如下组件:启动子、人PDCD5的cDNA、终止子和SV40polyA信号序列;
所述PDCD5基因表达盒中,所述启动子为小鼠CMV启动子,所述终止子为TGA终止子,所述SV40polyA信号序列位于所述终止子的下游;
所述重组腺病毒是将所述PDCD5基因表达盒插入SG600病毒基因组得到的。
2.如权利要求1所述的重组腺病毒,其特征在于:所述重组腺病毒是将重组表达载体pPE3-F11B-PDCD5与pSG600共转染哺乳动物细胞得到;
所述pPE3-F11B-PDCD5是pENTR11-PDCD5和pPE3-F11B-RC按照图3所示的方式重组得到的;所述pENTR11-PDCD5是将Age I和Not I酶切pClon15-PDCD5得到的小片段与Age I和Not I酶切pENTR11-Linker得到的大片段按照图2所示的方式连接得到的;所述pClon15-PDCD5是将PDCD5基因按照图1所示的方式插入pClon15得到的。
3.如权利要求2所述的重组腺病毒,其特征在于:所述哺乳动物细胞为293细胞;所述PDCD5基因为用EcoR I酶切pDC316-PDCD5得到的小片段。
4.重组表达载体pPE3-F11B-PDCD5,所述pPE3-F11B-PDCD5是pENTR11-PDCD5和pPE3-F11B-RC按照图3所示的方式重组得到的;所述pENTR11-PDCD5是将Age I和Not I酶切pClon15-PDCD5得到的小片段与Age I和Not I酶切pENTR11-Linker得到的大片段按照图2所示的方式连接得到的;所述pClon15-PDCD5是将PDCD5基因按照图1所示的方式插入pClon15得到的。
5.如权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于:所述PDCD5基因为用EcoRI酶切pDC316-PDCD5得到的小片段。
6.一种药物,它的活性成分为权利要求1-3中任一所述的重组腺病毒;所述药物为如下1)和/或2)和/或3)和/或4)的药物:
1)抑制肿瘤细胞生长的药物;
2)诱导肿瘤细胞凋亡的药物;
3)抑制肿瘤生长的药物;
4)治疗癌症的药物。
7.如权利要求6所述的药物,其特征在于:所述肿瘤细胞为白血病细胞系细胞;所述肿瘤细胞为K562细胞、MEG-01细胞、Dami细胞、NB4细胞或6T-CEM细胞;所述肿瘤为白血病;所述癌症为白血病。
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