[发明专利]一种辅助筛选抗条锈病小麦的方法及其专用引物无效
申请号: | 200910078901.1 | 申请日: | 2009-02-26 |
公开(公告)号: | CN101487056A | 公开(公告)日: | 2009-07-22 |
发明(设计)人: | 夏先春;何中虎;殷贵鸿 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关 畅;任凤华 |
地址: | 100081北京市海淀区中关村南大街1*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辅助 筛选 条锈病 小麦 方法 及其 专用 引物 | ||
1.辅助筛选抗条锈病小麦的引物对,是由序列表的序列1所示DNA和序列表的 序列2所示DNA组成的引物对。
2.一种辅助筛选抗条锈病小麦的方法,包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA 为模板,用权利要求1所述引物对进行PCR扩增,检测扩增产物,扩增产物中有343bp 条带的待测小麦为候选的抗条锈病小麦。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述PCR扩增中,每15μl的PCR 反应体系如下:20ng的模板DNA,150μM的dNTPs,0.25U Taq DNA polymerase,序 列1所示的引物7pmol、序列2所示的引物7pmol,1.5μl的10×PCR buffer,1.5mM 的MgCl2,用无菌蒸馏水补充反应体系至15μl;
所述PCR扩增的程序为:95℃预变性5min;随后45个循环:95℃变性1min,45℃ 退火1min,72℃延伸2min;最后延伸7min。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述检测扩增产物是对扩增 产物进行4%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后银染显色。
5.权利要求1所述引物对在制备辅助筛选抗条锈病小麦的试剂盒中的应用。
6.一种辅助筛选抗条锈病小麦的试剂盒,其特征在于:含有权利要求1所述引 物对。
7.权利要求1所述引物对、权利要求2至4中任一所述方法、权利要求6所述 试剂盒在小麦育种中的应用。
8.抗条锈病基因YrZH8的分子标记,是序列表的序列3所示的DNA。
9.权利要求8所述分子标记在辅助筛选抗条锈病小麦中的应用。
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