[发明专利]荧光标记大麻性别基因特异片段检验系统及方法有效
| 申请号： | 200910081869.2 | 申请日： | 2009-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN101525666A | 公开（公告）日： | 2009-09-09 |
| 发明（设计）人： | 裴黎;凃政;彭建雄;季安全;张贵芹;董林芳;徐小玉;张颖;郭佳;冯涛 | 申请（专利权）人： | 公安部物证鉴定中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京中海智圣知识产权代理有限公司 | 代理人： | 曾永珠 |
| 地址： | 100038北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 荧光 标记 大麻 性别 基因 特异 片段 检验 系统 方法 | ||
1.一种荧光标记大麻性别基因特异片段检验方法，其特征在于：所述检验方法是以荧光标记的DM016为雄性引物、以荧光标记的DM029为雌性引物并以待测大麻DNA为模板的PCR反应系统进行反应，其中所述引物序列如下：
DM016：(F)5’FAM-GCCCAAGTTGCTGCTGAG3’
(R)5’CCCACCGTTTAGGGAGCA3’
DM029：(F)5’FAM-AGCCTGTCTAAGAGTGGG3’
(R)5’ACGTTGTTGCTCGTAAAT3’，
PCR扩增产物经电泳测得各产物的片段长度，得到待测植物性别检测结果。
2.根据权利要求1所述的大麻性别基因特异片段检验方法，其特征在于：
所述PCR反应体系的初始变性条件：92-98℃，2-11分钟；
变性条件：91-97℃，30秒钟-2分钟；
退火：54-66℃，30秒钟-2分钟，30循环；
延伸条件：69-75℃，1分钟；
终延伸：72℃，2分钟；
保温：4℃维持；
PCR扩增产物经电泳测得各产物的片段长度，得到待测植物性别检测结果。
3.根据权利要求2所述的大麻性别基因特异片段检验方法，其特征在于：
所述PCR反应体系的初始变性条件：95℃，11分钟；
变性条件：94℃，30秒钟；
退火：60℃，30秒钟，30循环；
延伸条件：72℃，1分钟；
终延伸：72℃，2分钟；
保温：4℃维持；
PCR扩增产物经电泳测得各产物的片段长度，得到待测植物性别检测结果。
4.根据权利要求2或3所述的大麻性别基因特异片段检验方法，其特征在于：
所述电泳采用荧光毛细管电泳技术。
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