[发明专利]福氏痢疾杆菌血清型检测用引物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及福氏痢疾杆菌血清型检测用引物及其应用，特别涉及使用所述引物进行单重扩增以用于鉴定福氏痢疾杆菌血清型。

背景技术

福氏痢疾杆菌(S.flexneri)是发展中国家细菌性痢疾的主要病原菌(Wang，X.Y.et al.Trend and disease burden of bacillary dysentery in China(1991-2000).Bulletin of The World Health Organization 84，561-568，(2006))，每年全球大约有2百万人感染，导致65万人死亡(W.H.O.Research prioritiesfor diarrhoeal disease vaccines：memorandom from a WHO meeting.Bull.W.H.O. 69，667-676(1991))。在我国，福氏痢疾发病数占全国痢疾感染的2/3以上，是重要的致病菌(http://www.moh.gov.cn)。

福氏痢疾杆菌菌体外膜脂多糖(LPS)O抗原是痢疾杆菌重要的毒力因子，也是宿主针对痢疾杆菌感染保护性免疫反应的作用靶位。根据O抗原的不同，福氏痢疾杆菌分为Fx、Fy、F1a、F1b、F1c、F2a、F2b、F3a、F3b、F4a、F4b、F5a、F5b、Fxb(关于该血清型的命名存在争议，Pryamukhina等人在1988年将其命名为F4c(Pryamukhina，N.S.&Khomenko，N.A. Suggestion to supplement Shigella flexneri classification scheme with thesubserovar Shigella fle

目前，鉴定福氏痢疾杆菌及其它群痢疾杆菌的血清型主要采用免疫动物的抗血清与分离菌株进行玻片凝集反应，根据免疫凝集结果进行判定(Edwards，P.R.，and W.H.Ewing.Identification of Enterobacteriaceae.Burgess Publishing Company，Minneapolis，Minn，126-131(1972))。尽管福氏痢疾杆菌血清型诊断系统已经建立(Ewing，W.H.Edwards and Ewing′sidentification of Enterobacteriaceae，.Elsevier Science Publishing Co，lnc，NewYork.4th ed.，，135-172(1986))，而且多种商业化诊断血清亦广泛应用，但是仍有具有诸多不足(Evins，G.M.，Gheesling，L.L.&Tauxe，R.V.Qualityof commercially produced Shigella serogrouping and serotyping antisera.J ClinMicrobiol 26，438-442(1988))，如：样品需要进行预培养和分离单菌落，延长了诊断周期；血清反应受细菌培养条件和生长状态影响；部分血清型间存在交叉反应，导致错误判读；结果判定通过肉眼观察，具有个体主观性。因此，寻找福氏痢疾杆菌血清型的分子标识，发展基于PCR等分子生物学技术的鉴定方法，对于及时、准确鉴定病原菌血清型具有重要意义。

发明内容

本发明的一个目的在于寻找福氏痢疾杆菌血清型的分子标识，发展分子生物学技术鉴定福氏痢疾杆菌血清型的方法。

本发明的另一目的在于提供一种福氏痢疾杆菌血清型检测用引物。

本发明的另一目的在于提供所述引物的应用，具体包括其在检测福氏痢疾杆菌血清型中的应用，以及在制备福氏痢疾杆菌血清型检测用制剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种利用所述引物扩增检测福氏痢疾杆菌血清型的方法。

本发明的另一目的在于提供一种福氏痢疾杆菌血清型检测用制剂如试剂盒。