[发明专利]一种检测传染病病原体的方法及试剂盒

权利要求书

1、一种对可能存在于生物样品中的传染病病原体进行检测的方法，包括：

(i)扩增生物样品的核酸片段，所述核酸片段为以下的一种或一种以上的组合：

流感病毒A亚型基质蛋白1基因的如SEQ ID NO.1所示的核酸片段；

流感病毒B亚型的第八节段基因的如SEQ ID NO.2所示的核酸片段；

人副流感病毒1亚型核衣壳蛋白基因的如SEQ ID NO.3所示的核酸片段；

人副流感病毒2亚型核衣壳蛋白基因的如SEQ ID NO.4所示的核酸片段；

人副流感病毒3亚型核衣壳蛋白基因的如SEQ ID NO.5所示的核酸片段；

人副流感病毒4亚型磷酸蛋白基因的如SEQ ID NO.6所示的核酸片段；

呼吸道合胞病毒N基因的如SEQ ID NO.7所示的核酸片段；

风疹病毒的糖蛋白E1基因的如SEQ ID NO.8所示的核酸片段；

柯萨奇病毒B1型基因组的如SEQ ID NO.9所示的核酸片段；

(ii)用探针进行检测，所述探针与步骤(i)扩增产物中的一种特异性杂交。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(i)利用NASBA技术扩增样品的核酸片段，NASBA运行条件为41℃～45℃温育90～150分钟。

3、根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(ii)中所述探针与步骤(i)所得扩增产物的杂交在固体支持物上进行。

4、如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(i)使用以下9组寡核苷酸序列的一种或一种以上的组合作为引物进行扩增：

第1组引物用于扩增如SEQ ID NO.1所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；

第2组引物用于扩增如SEQ ID NO.2所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示；

第3组引物用于扩增如SEQ ID NO.3所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示；

第4组引物用于扩增如SEQ ID NO.4所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示；

第5组引物用于扩增如SEQ ID NO.5所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示；

第6组引物用于扩增如SEQ ID NO.6所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示；

第7组引物用于扩增如SEQ ID NO.7所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.28所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示；

第8组引物用于扩增如SEQ ID NO.8所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.31所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.32所示；

第9组引物用于扩增如SEQ ID NO.9所示的核酸片段，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.34所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.35所示。

5、根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(ii)使用捕获探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.37所示，所述捕获探针直接或间接的连接在固体支持物上。