[发明专利]一种硝基呋喃化合物及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 200910085647.8 | 申请日： | 2009-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN101643505A | 公开（公告）日： | 2010-02-10 |
| 发明（设计）人： | 吴小平;王战辉;江海洋;张静;阮永磊;王进;王亚辉 | 申请（专利权）人： | 北京维德维康生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K1/113;C07K16/44;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关 畅;任凤华 |
| 地址： | 100085北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 硝基 呋喃 化合物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种硝基呋喃化合物，是将5-硝基呋喃-2-丙烯酸与载体蛋白偶联得到的偶 联物；
所述硝基呋喃化合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将5-硝基呋喃-2-丙烯酸、N，N’-二环己基碳化二亚胺(DCC)和N-羟基琥 珀酰亚胺(NHS)混合，将混合物溶解于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，得到溶 液A；
将载体蛋白溶解于磷酸盐缓冲液中，得到溶液B；
2)将溶液B滴加到溶液A中，得到硝基呋喃化合物；
所述步骤1)中，所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸、所述N，N’-二环己基碳化二亚胺 和所述N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1∶(3-5)∶(2-3)；
所述载体蛋白为牛血清白蛋白；
所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸与载体蛋白的摩尔比为(8-10)∶1。
2.权利要求1所述化合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将5-硝基呋喃-2-丙烯酸、N，N’-二环己基碳化二亚胺(DCC)和N-羟基琥 珀酰亚胺(NHS)混合，将混合物溶解于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，得到溶 液A；
将载体蛋白溶解于磷酸盐缓冲液中，得到溶液B；
2)将溶液B滴加到溶液A中，得到硝基呋喃化合物；
所述步骤1)中，所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸、所述N，N’-二环己基碳化二亚胺 和所述N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1∶(3-5)∶(2-3)；
所述载体蛋白为牛血清白蛋白；
所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸与载体蛋白的摩尔比为(8-10)∶1。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述5-硝基呋 喃-2-丙烯酸、所述N，N’-二环己基碳化二亚胺和所述N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为 1∶4∶3。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸与载 体蛋白的摩尔比为8∶1。
5.根据权利要求2-4中任一所述的方法，其特征在于：所述方法还包括将所 述权利要求1所述化合物进行透析的步骤，所述透析的条件为：4-20℃用PBS透 析72-96小时；
所述方法还包括将透析后的权利要求1所述化合物进行离心取上清的步骤，所 述离心的条件为4℃条件下5000-8000rmp离心20-30分钟。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法还包括将所述权利要 求1所述化合物进行透析的步骤，所述透析的条件为：4℃用PBS溶液透析72小 时；
所述方法还包括将透析后的权利要求1所述化合物进行离心取上清的步骤，所 述离心的条件为4℃条件下5000rpm离心30分钟。
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