[发明专利]用于对生物体的转录本或其片段进行分离的方法及其应用

权利要求书

1.一种用于对包含18sRNA和28sRNA的生物体的转录本或其片段进行分离的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)将所述生物体的总RNA进行逆转录，得到双链cDNA片段；

(2)使用在由所述生物体的18S rRNA和28S rRNA逆转录而得到的双链cDNA片段的序列范围内没有切割位点的限制性内切酶或其组合，对步骤(1)中得到的双链cDNA片段进行切割，所述限制性内切酶能够切割步骤(1)得到的双链cDNA中除去18S rRNA和28S rRNA逆转录而得到的双链cDNA片段以外的总量的40％或以上的其它种类的双链cDNA片段；

(3)将步骤(2)中被切割的片段与未被切割的片段进行分离。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述包含18S RNA和28SRNA的生物体为人类。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述包含18S RNA和28SRNA的生物体为猴。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述包含18S RNA和28SRNA的生物体为大鼠。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述包含18S RNA和28SRNA的生物体为小鼠。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述包含18S RNA和28SRNA的生物体为果蝇。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为人类或猴，所述限制性内切酶为PaeR7I或MfeI。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为人类或猴，所述限制性内切酶组合为ApaLI和BclI或ApaLI和BspHI。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为人类或猴，所述限制性内切酶组合为Acc65I、ApaLI、BclI、BspHI、MfeI和PaeR7I。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为人类或猴，所述限制性内切酶组合为Acc65I、AgeI、ApaLI、BclI、BspHI、FseI、MfeI、PaeR7I。

11.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为人类或猴，所述限制性内切酶组合为Acc65I、AclI、AgeI、ApaLI、AsiSI、BclI、BmtI、BspDI、BspHI、ClaI、FseI、KpnI、MfeI、MluI、NheI、PaeR7I、PspXI、SalI、SbfI、TliI和XhoI。

12.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为小鼠或大鼠，所述限制性内切酶为PaeR7I或MfeI。

13.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为小鼠或大鼠，所述限制性内切酶组合为ApaLI和BclI或ApaLI和BspHI。

14.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为小鼠或大鼠，所述限制性内切酶组合为Acc65I、ApaLI、BclI、BspHI、MfeI和PaeR7I。

15.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为小鼠或大鼠，所述限制性内切酶组合为Acc65I、AgeI、ApaLI、BclI、BspHI、FseI、MfeI和PaeR7I。

16.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为小鼠或大鼠，所述限制性内切酶组合为Acc65I，AclI，AgeI，ApaLI，AsiSI，BclI，BmtI，BspDI，BspHI，ClaI，FseI，KpnI，MfeI，NheI，PaeR7I，PciI，PspXI，SalI，SbfI，TliI和XhoI。

17.根据权利要求1所述的方法，其中，所述包含18sRNA和28sRNA的生物体为果蝇，所述限制性内切酶为PaeR7I或NotI。