[发明专利]表达猪干扰素(α、β或γ)的重组新城疫弱毒疫苗株

权利要求书

1.一种表达编码猪干扰素的基因的重组新城疫弱毒疫苗株。

2.根据权利要求1的重组新城疫弱毒疫苗株，其为重组新城疫LaSota弱毒疫苗株。

3.根据权利要求1或2的重组新城疫弱毒疫苗株，其中所述猪干扰素是猪α、β和γ-干扰素，优选所述猪α、β和γ-干扰素的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示，更优选编码所述猪α、β和γ-干扰素的基因如SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。

4.根据权利要求1或2的重组新城疫弱毒疫苗株，其为rL-Swine α、rL-Swine β、或rL-Swineγ。

5.根据权利要求1-4中任何一项的重组新城疫弱毒疫苗株在制备猪干扰素中的应用。

6.一种生产权利要求1-4中任何一项的重组新城疫弱毒疫苗株的方法，该方法包括：

(1)构建转录质粒，该转录质粒包括其中插入编码猪干扰素的基因的所述新城疫弱毒疫苗株的基因组cDNA序列；

(2)构建一个或多个转录辅助质粒，该转录辅助质粒包括编码所述新城疫弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列、编码所述新城疫弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列、和编码所述新城疫弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列；

(3)将所述转录质粒和转录辅助质粒共转染所述新城疫弱毒疫苗株复制许可的宿主细胞，培养转染后的宿主细胞；

(4)收获上清液，过滤后继续敏感细胞传代或接种鸡胚尿囊腔救获重组病毒株。

7.根据权利要求6的方法，其中所述重组新城疫弱毒疫苗株是重组新城疫LaSota弱毒疫苗株。

8.根据权利要求6或7的方法，其中所述转录质粒是pBRN-FL-SwIFNα、pBRN-FL-SwIFNβ、或pBRN-FL-SwIFNγ。

9.根据权利要求6或7的方法，其中所述转录辅助质粒是质粒pBSNP、pBSP或pBSL。

10.根据权利要求6-9中任何一项的方法，其中所述宿主细胞是BHK-21。

11.根据权利要求6-10中任何一项的方法制备的重组新城疫弱毒疫苗株，优选为rL-Swine α、rL-Swine β、或rL-Swine γ。

12.一种生产猪干扰素的方法，该方法包括：

1)将根据权利要求1-4中任何一项的重组新城疫弱毒疫苗株接种敏感细胞或接种鸡胚尿囊腔；

2)收获细胞上清液或鸡胚尿囊液。

13.重组新城疫LaSota弱毒疫苗株rL-Swine α的SPF鸡胚尿囊液，其保藏号为CGMCC No.2615。

14.重组新城疫LaSota弱毒疫苗株rL-Swine β的SPF鸡胚尿囊液，其保藏号为CGMCC No.2628。

15.重组新城疫LaSota弱毒疫苗株rL-Swine γ的SPF鸡胚尿囊液，其保藏号为CGMCC No.2616。