[发明专利]用于检测Hum j 3特异性IgE抗体的ELISA试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种以小鼠杂交瘤单抗和天然葎草花粉纯化主要致敏蛋白Hum j3为基础的用于检测葎草花粉过敏患者血中Hum j3specific-sIgE(Hum j3特异性IgE)水平的ELISA试剂盒，为将来Hum j3过敏的分子免疫治疗提供了全新的、易于标准化的途径。

背景技术

蔷薇亚纲大麻科一年生缠绕草本植物葎草(Humμlus japonicus或Humμlus scandens)，原产我国，广泛分布于远东地区，是一种重要的夏秋季花粉致敏原。我国除新疆、青海以外的各省区均有分布，东亚各国(朝鲜、日本、俄罗斯、越南)以及欧洲、美国西海岸地区亦有分布。上世纪八十年代由北京协和医院牵头的第一次全国性气传致敏花粉调查中，在79个花粉收集点中有53个点可收集到葎草花粉，仅次于蒿属花粉，其分布范围基本上覆盖全国，播散高峰为八、九月^[1]。北京协和医院首次发现葎草花粉是我国夏秋季节仅次于蒿属花粉的重要致敏原，是导致临床上出现变应性鼻炎、过敏性结膜炎、花粉性皮炎、季节性哮喘等花粉症症状的重要病因，很大程度上影响了患者的生活质量^[2]。

现阶段对于花粉症的诊断和治疗，依赖于特异性变应原疫苗(Specific Allergenic Vaccines)，而变应原特异的免疫治疗(Allergen-Specific Immunotherapy，SIT)是目前成熟的针对花粉症病因治疗的方法。变应原疫苗是指包括变应原提取物以及其它成分的生物制剂，可有效用于人类过敏性疾病的诊断、预防和治疗^[3]。变应原特异的免疫治疗(Allergen-Specific Immunotherapy，SIT)通过调节抗原提呈细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞的免疫应答以及调节介导变态反应效应细胞的功能和数量，从而减轻患者症状^[4]。WHO发布指导文件^[5]指出，SIT是唯一能影响过敏性疾病自然病程、有效阻止变应性鼻炎进展为哮喘的治疗方法。

尽管SIT是目前成熟的针对花粉症病因治疗的方法，但现阶段以变应原浸液为基础的变应性疾病免疫诊断和治疗模式并非是最理想的模式，而基于变应原组分(allergen component-resolved diagnosis andtreatment)的诊断和治疗模式的尝试，则代表了一种新的方向^[6，7]。因为即使是对于同一种花粉过敏，不同患者的血清致敏蛋白反应谱也不一样，例如同为葎草过敏患者，由于葎草花粉变应原种类很多，其不同个体血清中可能含有针对葎草花粉变应原浸液中不同致敏成分反应的特异性IgE(sIgE)。因此，以花粉浸液作为皮试和体外IgE检测试剂，仅能得出对该花粉过敏的信息，但无法确认对何种致敏蛋白过敏。最近，由于分子生物学的进展，大量的变应原被纯化、鉴定和重组表达，基于变应原组分(allergen component-resolved diagnosis andtreatment)的诊断和治疗模式的尝试，更为科学的反应了过敏患者的体内致敏蛋白血清sIgE反应谱，所以诊断更为特异，相应也就能达到个体化免疫治疗的目的。同时由于排除了对个体患者无意义的致敏蛋白和非致敏蛋白，也使得该个体化免疫治疗更为安全，使变应原特异的免疫治疗在医疗实践中能达到WHO关于医疗保健的质量定义，即“高度的专业诊断标准”、“有效的利用资源”、“患者承担风险最低”、“患者高度满意”、“以及患者治疗的连续性”^[8-16]。