[发明专利]一种木糖醇的制备方法

权利要求书

1.一种木糖醇的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将经 过培养的木糖醇酵母菌种接种到发酵培养基中，进行有氧、微氧两段 组合发酵，即得到木糖醇；其中第一阶段为好氧发酵阶段，第二阶段 为微好氧发酵阶段；

其中，所述木糖醇酵母菌种购自浙江大学，编号为Candida SP；

所述发酵培养基包括下述重量百分比的组分：碳源12～14％、酵 母膏0.1～0.3％、玉米浆0.5～1％、MgSO₄·7H₂O 0.01～0.05％和 KH₂PO₄0.02～0.07％；其中，碳源为玉米芯水解糖；

在好氧发酵阶段，控制pH 5.5～6.3，通过将无菌空气以通风比 为1∶0.3～0.6的通风速率流入发酵罐的发酵培养基中，搅拌转速为 200～300rpm，维持溶氧浓度为60～90％，温度控制在30～32℃， 好氧培养10～20小时，当细胞浓度O.D.值达到15～30时，转入第 二阶段发酵；在微好氧发酵阶段，维持溶氧浓度在1～10％，在发酵 过程中经三次将发酵温度从30℃升至38℃，添加无菌pH调节剂将 发酵体系pH控制在5.5～6.3，发酵55～65小时；所述pH调节剂选 自氨水、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸钙和氢氧化钙中的一种或多种。

2.如权利要求1所述的木糖醇的制备方法，其特征在于，在将所 述木糖醇酵母菌种接种到发酵罐中培养之前进行下述培养：

1)平板培养：采用玉米芯水解液加氮源为培养基，将木糖醇酵 母菌种接到平板培养基中，30℃培养18～26小时；

2)摇瓶种子培养：将平板培养的木糖醇酵母菌种接到摇瓶种子 培养基中，30℃培养15～20小时，pH控制在5.0～6.8，摇床转速 180rpm；

3)种子罐种子培养：将摇瓶培养基培养的木糖醇酵母菌种接到 种子罐种子培养基中，接种量按体积比为5～10％，30℃培养15～24 小时，pH控制在5.0～6.8，搅拌转速150～300rpm，通风比1∶0.3～ 0.6；

4)发酵摇瓶培养：将摇瓶种子培养基培养的木糖醇酵母菌种接 酵摇瓶培养基中培养，接种量按体积比为5～10％，30～33℃培 养60～75小时，摇床转速160～220rpm；

所述平板培养基包括下述重量百分比的组分：玉米芯水解糖5％， 酵母膏0.4％，蛋白胨0.8％，玉米浆0.3％，琼脂2％，其余为水；

所述摇瓶种子培养基包括下述重量百分比的组分：玉米芯水解糖 5％，酵母膏0.4％，蛋白胨0.8％，玉米浆0.3％，其余为水；

所述种子罐种子培养基包括下述重量百分比的组分：玉米芯水解 糖6％，酵母膏0.3％，蛋白胨0.5％，玉米浆0.5％，其余为水；

所述发酵摇瓶培养基包括下述重量百分比的组分：玉米芯水解糖 13～15％，酵母膏0.3％，蛋白胨0.2％，玉米浆0.5％，MgSO₄·7H₂O 0.01～0.05％，KH₂PO₄0.02～0.07％，其余为水。