[发明专利]一种植物组织培养中根系暗培养的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，特别是涉及一种植物组织培养中根系暗培养的方法。

背景技术

组织培养过程中组培苗转入生根培养基后，往往先进行1周左右的暗培养，再转入正常光照培养，有利于根的形成。

在一些木本植物试验中，暗培养能增加20％的生根率。但是暗培养影响上部植物的正常生长，不利于培养壮苗。若在生根培养培养基中加入0.1-0.3％活性炭，不仅使生根处于较暗的条件下，而且还能吸附一些有毒物质，使根不易褐变，有利于根的形成和生长。

光照强度高时，可增加光合产物的积累，减少呼吸作用的消耗。一般在组织培养过程中往往通过光照培养和暗培养的交替来促进根的形成和培养壮苗。

发明内容

本发明的目的是提供一种方案来营造整个生根培养基形成一个暗培养的环境，但并不改变培养基的组成。使地上部可处于一个全光照条件，增加光合产物的积累；使生根培养基始终处于一个黑暗环境，促进生根的同时并不影响对生根过程的观察。

为达到上述目的，本发明的技术方案提供一种植物组织培养中根系暗培养的方法，其是在生根培养基的表面覆盖表面覆盖物，在生根培养基的四周及底部设置遮盖物。

本发明的方法，其中所述表面覆盖物可以由为任何对植物生产无害或有一定益处的生物材料组成，其应该是可以透水透气的。同时应该可以和生根培养基一起灭菌，还可以一直保持在培养基表面。基于以上原则，本发明优选表面有蜡质层的农业废弃物为表面覆盖物，其对植物生长有益无害，且粉碎后可透气透水，并且由于表面蜡质层的存在使其在高温灭菌时还可以依靠表面张力保持在培养基的表面。表面有蜡质层的农业废弃物更优选为麦壳、稻壳、麦秸或稻杆。成本低，价廉易得，且环保，二次利用。其中所述农业废弃物经粉碎后，清洗，在70-90℃干燥10-12小时后使用。表面覆盖物还可利用密度小于水密度且耐高温高分子材料制成的颗粒材料，只要能悬浮于培养基表面且又不会影响培养基的成分的物质即可。如可悬浮的PP(聚丙烯)或PC(聚碳酸酯)空心颗粒球，只要能悬浮不沉入培养基即可。

本发明的方法，其中所述遮盖物为任何对植物生长无害的、可以散步在生根培养基附近的、形成黑暗环境的物质，如河沙、泡沫塑料等。如采用河沙，将其过两层筛，低筛2-3毫米，上筛5-6毫米，取中间部分的过筛物，清洗后在70-90℃干燥10-12小时后使用。如采用泡沫塑料，直接将其包围在生根培养基四周和底部即可。

本发明的方法，其中所述表面覆盖物经干燥后加入已装好生根培养基的培养容器中，覆盖整个培养基表面，然后将培养基进行灭菌，静止冷却后表面覆盖物保持覆盖在培养基表面。然后将幼苗通过在生根培养基表面开口的方式接入到已灭菌好的培养基中。最好在接种好的表面已覆盖的接种物的四周和底部设置遮盖物。

上述技术方案具有如下优点：通过上述方案使整个生根培养基处于一个完全的黑暗环境，类似于土壤中根系生长的光照条件。但并不改变培养基的组成。从而使植物地上部处于一个全光照条件，增加光合产物的积累；而生根培养基始终处于一个黑暗环境，促进生根，同时，也能很方便的观察根系的生长情况。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1：

一、生根培养基表面覆盖物的制备：

将麦壳或稻壳(或麦秸、稻杆等一类表面含有腊质成分的秸杆粉碎至3-5毫米)用清水洗净，洗去尘土和沙粒，然后80℃干燥10-12个小时。然后备用。

二、生根培养基的制备：

不同种类的生根培养基，按照其不同配方和注意事项进行配制，其配制过程和方法不做任何变化。将琼脂加入后煮沸然后分装到培养容器中。将干燥过的生根培养基表面覆盖物按照培养容器的大小加入不同的量，加入量以覆盖真个培养基表面为量。由于覆盖物的表面有蜡质层，所以覆盖物不会全部沉入培养基中，因此将整个培养基表面覆盖后光线不能进入。然后将培养基进行灭菌，灭菌后覆盖物仍然在表面，将灭菌后的培养基静止冷却，保持其覆盖物仍然在培养基表面的状态。

三、生根培养的操作：

将需要生根的幼苗按照常规操作接入到生根培养基中，与传统接种不同，是先在培养基表面化出一道口，然后将幼苗插入其中固定。

四、培养基四周及底部遮盖物的制备：

取河沙，过两层筛，低筛2-3毫米，上筛5毫米。取中间部分，水洗后80℃干燥然后备用。

五、暗培养过程的制造：