[发明专利]一种检测人畜共患病病毒的基因芯片及其应用无效
申请号: | 200910093498.X | 申请日: | 2009-09-24 |
公开(公告)号: | CN102031312A | 公开(公告)日: | 2011-04-27 |
发明(设计)人: | 杨银辉;李永强;康晓平;刘洪;孙庆歌;户义;李靖;祝庆余 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C40B40/06;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100071 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 人畜 患病 病毒 基因芯片 及其 应用 | ||
1.一种基因芯片,包括病毒检测探针,其特征在于:所述病毒检测探针由以下的探针组成:
核苷酸序列分别是表2中序列1-150的150个病毒检测探针和核苷酸序列分别是序列1-150的反向互补序列的150个病毒检测探针。
2.根据权利要求1所述的基因芯片,其特征在于:所述基因芯片上还固定有1条核苷酸序列如表2中序列151所示的阳性对照探针。
3.根据权利要求1或2所述的基因芯片,其特征在于:所述基因芯片由以下探针组成:核苷酸序列分别是表2中序列1-150的150个病毒检测探针、核苷酸序列分别是序列1-150的反向互补序列的150个病毒检测探针和1条核苷酸序列如表2中序列151所示的阳性对照探针。
4.权利要求1至3中任一所述的基因芯片与待测生物样品进行杂交的方法,包括以下步骤:
将待测生物样品与权利要求1-3任一所述的基因芯片杂交,杂交条件是:杂交液中的去离子甲酰胺浓度为25-60%(体积百分比),杂交的温度是42-61℃,杂交的时间0.5-6小时。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述杂交条件是如下1)或2)或3)或4):
1)杂交液中的去离子甲酰胺浓度为40-60%(体积百分比),所述杂交的温度为51-61℃,所述杂交的时间为1-4小时;
2)杂交液中的去离子甲酰胺浓度为40-50%(体积百分比),所述杂交的温度为51-54℃,所述杂交的时间为1-2小时;
3)杂交液中的去离子甲酰胺浓度为50-60%(体积百分比),所述杂交的温度为58-61℃,所述杂交的时间为2-4小时;
4)杂交液中的去离子甲酰胺浓度为50%(体积百分比),所述杂交的温度为51℃,所述杂交的时间为2小时。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于:所述基因芯片在杂交前用浓度为0.25g/100ml的NaBH4进行封闭。
7.根据权利要求4-6任一所述的方法,其特征在于:所述待测生物样品是基孔肯亚病毒、日本乙脑病毒、狂犬病毒或辛德毕斯病毒的核酸的扩增产物。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述扩增产物是PCR扩增产物。
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