[发明专利]软骨寡聚基质蛋白在制备血管钙化治疗药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种医学领域，特别涉及软骨寡聚基质蛋白在制备治疗血管钙化的药物中的应用。

背景技术

血管钙化是指在血管壁、心肌和心脏瓣膜处出现钙磷沉积。临床上血管钙化常见于动脉粥样硬化、晚期肾病及糖尿病的病人。其中，动脉粥样硬化的钙化主要见于血管内膜的粥样斑块处；而晚期肾病、糖尿病病人的血管钙化则主要发生在血管的中膜，往往导致受累血管僵硬性增加、舒张功能降低和左心室肥大。流行病学调查证明血管中膜钙化与糖尿病、慢性肾病病人的心血管并发症的高发病率和死亡率密切相关(John RC，Leopold JA，Loscalzo J.Vascular calcification：pathobiologicalmechanisms and clinical implications.Circ Res，2006，99：1044～59)。以往，血管钙化被认为是钙磷代谢异常，从而在血管过度沉积的被动过程，然而临床上单纯控制钙磷的摄入并不能有效地预防和控制钙化。近十年来人们对血管钙化的认识终于有了新的突破：发现它是一个受到高度调控的主动过程，血管中膜平滑肌细胞或血管外膜周细胞、成纤维细胞等发生骨样/软骨样细胞表型转换；出现基质小泡以及各种调控骨分化的关键蛋白，类似于生理状态下的骨发育过程。由于血管钙化是一个多病因，多途径涉及到多种机制的复杂过程，如高无机磷或高钙磷乘积、继发性甲状甲状旁腺激素激素过多、氧自由基、炎症、细胞凋亡等过程均促进了钙化的发生，因此目前临床上采用的降低血钙血磷，比如运用无机焦磷酸，一些磷离子的结合剂，以及维生素K等，但仍不能有效的控制血管钙化的发生发展。人们对于钙化机制的深入认知对于钙化的防治具有重要意义。

软骨寡聚基质蛋白COMP(Cartilage Oligomeric Matrix Protein)是2005年Riessen等新证实的人血管中的正常细胞外基质，由五个长度相近的亚基组成的524KD五聚体大分子糖蛋白，主要由血管平滑肌细胞分泌(Riessen R，Fenchel M，Chen H，Axel DI，Karsch KR，Lawler J.Cartilage oligomeric matrix protein(thrombospondin-5)is expressed by human vascular smooth muscle cells.Arteriosclerosis，thrombosis，and vascular biology，2001；21：47-54.)。之所以被命名为软骨基质蛋白，是因为COMP也是软骨的主要基质成份。

发明内容

本发明的目的在于提供软骨寡聚基质蛋白(COMP)在制备预防或治疗血管钙化药物中的应用。

上述的软骨寡聚基质蛋白的氨基酸序列如GenBank号为EDL28815的自5’端第1位-755位所示。

上述的血管钙化是血管中膜的钙化，具体是指胸主动脉平滑肌细胞钙化或腹主动脉钙化。

本发明的另一目的在于提供表达软骨寡聚基质蛋白的重组腺病毒在制备预防或治疗血管钙化的药物中的应用。

上述的软骨寡聚基质蛋白的氨基酸序列如GenBank号为EDL28815的自5’端第1位-755位所示。

上述的血管钙化是血管中膜的钙化，具体是指胸主动脉平滑肌细胞钙化或腹主动脉钙化。

上述重组腺病毒的构建步骤如下：

1)将软骨寡聚基质蛋白的编码基因转入穿梭载体pShuttle-CMV(-)，构成重组穿梭载体；

2)将步骤1)得到的重组穿梭载体与pAdxis腺病毒骨架载体连接，制成含有所述软骨寡聚基质蛋白的编码基因的重组腺病毒载体；

3)将步骤2)得到的重组腺病毒载体感染受体细胞，得到重组腺病毒。

上述软骨寡聚基质蛋白的编码基因的编码序列如GenBank号为NM_016685的自5’端第15位-2279位所示。

上述受体细胞是真核生物的传代细胞；所述真核生物的传代细胞可以为HEK293细胞。

本发明的又一目的在于提供一种预防或治疗血管钙化的药物。

本发明提供的药物的活性成分是如下1)或2)：

1)软骨寡聚基质蛋白；

2)表达软骨寡聚基质蛋白的重组腺病毒。

上述重组腺病毒的构建步骤如下：

1)将软骨寡聚基质蛋白的编码基因转入穿梭载体pShuttle-CMV(-)，构成重组穿梭载体；