[发明专利]一种提高烟叶质量的生物菌剂

说明书

技术领域：

本发明涉及一种提高烟叶质量的生物菌剂，属生物技术领域。

背景技术：

烟叶糖含量偏高、钾含量偏低是影响云南烟叶质量的主要原因之一。降低烟叶糖含量、增加钾含量是烟草科学研究中最受关注的领域之一。烟叶糖含量除受遗传因素、生态因素影响外，应用特殊的施肥(施铵态氮肥、施充足的磷钾肥)、烘烤调制(提高湿度)技术是降低烟叶糖含量的主要途径；增施钾肥是提高烟叶含钾量的主要途径。

随着人们对吸烟与健康问题的广泛关注及减少公害、保护环境运动的兴起，烟草业如何在既能满足消费者的需求，又能减少公害、保护环境上面临严重挑战。目前，提高烟叶质量，必须适当降低烟叶糖含量、增加含钾量。研究开发具有实际应用价值的微生物技术来提高烟叶钾含量、适当降低糖含量，从而提高烟叶质量，具有重要的现实意义和广阔的应用前景。

发明内容：

本发明的主要目的在于提供一种能提高烟叶质量生物菌剂，为生产优质烟叶提供技术支持。

本发明采用的真菌是臭曲霉Aspergillus foetidus G01菌株，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院；保藏日期：2009年1月8日；保藏登记入册的编号CGMCC NO.2851。

G01菌株属于土壤真菌，系本发明人从大量土壤细菌菌株中筛选出来的，具有显著提高烟叶质量的能力，经中国农业科学院中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)进行鉴定，G01菌株为臭曲霉Aspergillusfoetidus。

本发明是这样实现的：G01菌株的试管种子培养，摇床扩大培养制备为生物制剂，将制剂应用于大田植烟土壤中，烟叶成熟调制后测定烟叶含钾量。

本发明细菌G01菌株的培养方法(以下为重量百分比)：

1、试管种子培养

试管斜面培养基配方为：葡萄糖1％、蛋白胨0.5％、KH₂PO₄ 1％、MgSO₄.7H₂O0.5％、琼脂2％、氯霉素0.1％、虎红钠盐0.03％，pH 7.0。

将G01菌株接种到试管斜面培养基上，30℃恒温培养2天，获得试管种子。

2、液体发酵培养

液体发酵培养基配方为：葡萄糖0.7～1％、蛋白胨0.3～0.5％、KH₂PO₄0.5～1％、MgSO₄.7H₂O 0.5％、氯霉素0.1％、虎红钠盐0.03％，pH 7.0。

将试管种接种子到500m l三角瓶液体培养基中，每瓶装200ml，于30～32℃摇床培养，培养时间3～5天，转速为150～200r/min，培养液下摇床后用稀释平板计数法测定菌悬液浓度，菌浓度为每ml活菌数≥10⁷。即得具有提高烟叶含钾量功能的生物制剂。

本发明生物制剂提高烟叶含钾量功能试验：

1、制备生物制剂：按前述G01菌株的培养方法制备试验用制剂；以未接种G01菌株的液体培养基处理作为对照。

2、生物制剂对烟草处理方法

烤烟K326品种(纯氮施用量7克/株，N∶P₂O₅∶K₂O＝1∶1∶3)，烟苗大田移栽后15天，将供试菌剂每株浇施100毫升，其余按优质烟生产技术常规管理，烟叶成熟后分叶位采摘按常规烘烤调制。

3、烟叶钾含量测定方法

总糖和还原糖按《烟草及烟草制品水溶性糖的测定连续流动法》YC/T159～2002方法测定。总糖(还原糖)含量降低百分率的计算方法为：

总糖(还原糖)含量降低百分率％＝(对照处理烟叶糖含量-制剂处理烟叶糖含量)/对照处理烟叶糖含量×100

烟叶钾含量按《烟草及烟草制品钾的测定火焰光度法》YC/T 173～2003方法测定。烟叶钾含量提高百分率的计算方法为：

钾含量提高百分率％＝(制剂处理烟叶钾含量-对照处理烟叶钾含量)/对照处理烟叶钾含量×100

4、试验结果

表1 生物制剂处理烟叶糖和钾含量测定结果

叶位：从烟株第一片脚叶往上计数编号。注：数据由云南省烟草科学研究所分析测试中心分析.