[发明专利]大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的α和γ基因序列

说明书

技术领域

本发明属于生物基因领域，尤其涉及大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的α和γ基因序列。

背景技术

过氧化物酶体增殖物受体(peroxisome proliferator-activatived receptors，PPARs)是一类由配体激活的核转录因子，属II型核受体家族成员。近年来许多研究表明PPARs在动物脂肪细胞分化和脂肪代谢中起着重要作用。PPAR分为三种亚型，即PPARα、β、γ，PPARα主要在肝细胞表达，可能主要参与调节脂质代谢；PPARγ主要在脂肪细胞表达，参与脂肪细胞分化及其成脂作用；而PPARβ分布广泛，可能与细胞的基础脂质代谢有关，也可能起到协助PPARα、γ的作用。PPAR在介导脂肪酸氧化及脂肪代谢中起重要作用，其靶基因均与脂质转运和代谢途径有关。过氧化物酶体增殖物反应元件(peroxisome proliferatorresponse element，PPRE)常位于脂质代谢相关蛋白或酶基因的上游，如编码脂肪酸结合蛋白、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、脂蛋白脂酶、过氧化物酶体脂肪酸氧化酶系及脂酰CoA去饱和酶等基因。PPARs与PPRE结合可激活上述基因表达，表明PPAR参与脂质代谢的许多环节。PPAR是调控肝脏脂肪酸氧化酶基因表达的转录因子，PPAR上调各种脂肪细胞蛋白包括解偶联蛋白1与脂蛋白脂酶的基因表达。PPARα的靶基因是一组相对同类的基因，它们参与了脂质分解代谢的几个方面：如脂肪酸的透膜吸收、脂肪酸在细胞内的结合、脂肪酸的氧化(在微球蛋白、过氧化物酶体和线粒体中)和脂蛋白的合成与运输。PPARα可以调节若干线粒体脂肪酸催化酶的表达，通过诱导肌肉和肝脏特异性的肉毒碱棕榈酰转运酶表达而调控脂肪酸向线粒体的转运，刺激β-氧化过程，降低脂肪酸和甘油三酯合成。PPARγ是脂肪组织发育的中心调控剂，其信号通路影响细胞和系统脂肪代谢。它能够诱导肝细胞表达载脂蛋白、脂肪酸氧化酶系与脂蛋白脂酶等，从而促进脂质的氧化代谢，降低血脂浓度。PPARγ的活化能够选择性诱导与脂肪酸吸收相关的基因在脂肪组织的表达，如脂蛋白脂酶、脂肪酸转运蛋白与酰基CoA合成酶基因等，但并不改变这些基因在肌肉组织中表达，从而导致脂肪酸在肌肉组织中的相对缺失。

大黄鱼(拉丁文名为：Pseudosciaena crocea，Richardson，可简写为Pseudosciaena crocea，R.或P.crocea)是中国重要的海水经济鱼类品种之一，养殖大黄鱼由于饲料营养价值不高而造成体内脂肪含量增加，降低了鱼肉的瘦肉率。通过对PPAR基因表达的调控可以改善大黄鱼体内的脂肪代谢过程，对提高鱼类的肌肉品质具有重大的意义。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的α和γ基因序列。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的α和γ基因序列，它们分别具有SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的基因序列。

本发明的有益效果是：本发明提供了大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的α和γ的基因克隆及其荧光定量方法，为探讨大黄鱼肝脏脂肪代谢的分子作用机制提供了理论基础，并对其他石首鱼科鱼类的肝脏PPARα和γ基因的克隆和表达提供了借鉴作用。

附图说明

图1为本发明的PCR电泳图；

图2为大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的α基因序列图；

图3为大黄鱼肝脏过氧化物酶体增殖物受体PPAR的γ基因序列图；

图4为表示PPARα和γ基因的表达水平随着日粮中共轭亚油酸含量的增加而显著升高的图，图中，*表示差异显著(P<0.05)。

具体实施方式

本发明首先设计四对简并性引物，然后从大黄鱼肝脏中提取RNA，经反转录获得的cDNA作为模板，通过两轮PCR反应获取大黄鱼肝脏PPARα和γ基因片段，经过连接和转化反应后，检测得：PPARα具有SEQ ID No.1所示的基因序列，PPARγ具有SEQ ID No.2所示的基因序列。

下面根据附图详细说明本发明，本发明的目的和效果将变得更加明显。

1、所用材料

大黄鱼：成年大黄鱼(约300g重)，由浙江省象山港宁波海湾水产养殖繁育中心提供，肝脏取出后液氮冻存备用。