[发明专利]用于荧光定量PCR法检测肠道克柔念珠菌的试剂盒有效
| 申请号： | 200910098556.8 | 申请日： | 2009-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN101555523A | 公开（公告）日： | 2009-10-14 |
| 发明（设计）人： | 陈瑜;郭仁勇;李兰娟;鲁海峰;陈珍晶 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64;C12R1/72 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 唐银益 |
| 地址： | 310027浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 荧光 定量 pcr 检测 肠道 念珠菌 试剂盒 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于荧光定量PCR法检测肠道克柔念珠菌的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：
反应总体积1/10的10×Taqman PCR buffer；
各0.15μmol/L～1μmol/L的上游和下游引物；
各200μmol/L的dATP、dTTP、dGTP、dCTP；
2.0mmol/L～3.5mmol/L的MgCl2；
0.05U/μl HOTSTART Taq DNA聚合酶；
0.02×SYBR green I荧光染料；
标准阳性模版，其浓度按定量标准曲线制备的要求系列稀释；
余量为无菌双蒸水；
所述两条引物为PCR扩增过程中使用的特异性扩增克柔念珠菌ITS区的引物，其中：
上游引物序列为：5’-AAAAGTCTAGTACGCTCGG-3’；
下游引物序列为：5’-GCATCCATGAAGAACGCAGC-3’；
所述标准阳性模版为克柔念珠菌标准菌株DNA经前述引物扩增，扩增产物与pGEMT-T Easy载体连接后获得的标准质粒DNA；编码所述扩增产物的基因具有SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。
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