[发明专利]酶法制备手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法

权利要求书

1.一种酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：所述的方法为以如式(II)所示的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物为原料，在生物酶的作用下与R₂H表示的有机胺或氨气反应，在有机溶剂中于15-60℃下制备如式(I)所示的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物，其反应方程式为：

其中，

R₁＝对，邻或间氟苯基或者对甲苯基；

R₂＝NR₄R₅，R₄、R₅＝氢、甲基、乙基、正或异丙基；

R₃为C₁-C₆的烷基、C₁-C₆的卤代烷基；

所述的生物酶为Lipase from Thermomyces lanuginosus，Lipase B from Candida antarctica，Lipase from Candide Rugosa，Lipase PS“Amano”SD，Lipase AS“Amano”，Lipase AK“Amano”，Lipase AYS“Amano”，Esterase from Escherichia coli.K12中的任一种；

所述有机溶剂为正己烷、异辛烷、甲基叔丁基醚、异丙醚中的一种或任意几种的混合物，所述有机溶剂的物质的量为4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物物质的量的5～30倍。

2.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：所述的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物与R₂H表示的有机胺或氨气的物质的量之比为1∶1～20；所述的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物与生物酶的质 量之比为1∶0.005～0.1。

3.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：所述R₂H表示的有机胺中，R₄、R₅中之一为氢、另一不为氢或者R₄、R₅均不为氢。

4.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：所述反应过程中使用无水硫酸铜，分子筛，高分子膜或者除水设备来除去反应中生成的水。

5.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：所述反应的反应时间为5～72小时。

6.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：该反应是以TLC小板跟踪监测反应，展开剂是乙酸乙酯与石油醚体积比为1～2∶1的混合试剂；通过监测反应中新产生的点的浓度和剩下的点的浓度来判断反应终点。

7.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：该反应以液相监测反应进度，通过监测液相色谱中4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的形成和4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物的消失来判断反应终点。

8.如权利要求1所述酶法制备式(I)所示的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物的方法，其特征在于：反应按照以下步骤进行：

a.按照4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物：R₂H表示的有机胺或氨气物质的量之比为1∶1～1∶3进行投料，所述的4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物∶生物酶质量之比为1∶0.005～1∶0.1，所述有机溶剂的物质的量为4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物质的 量的5～10倍，将4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸类化合物，溶解有有机胺或氨气的有机溶液，生物酶和有机溶剂依次投入到反应器中；

b.控制温度于15～60℃进行反应，期间用TLC硅胶板或液相色谱进行跟踪监测，直至反应基本不再进行；

c.过滤反应液，将生物酶除去，然后去除有机溶剂和未反应的有机胺或氨气，即可得到粗制的手性4-取代-2，6-二氧哌啶-3，5-二甲酸单酰胺类化合物。