[发明专利]单纯疱疹病毒抗体唾液快速检测试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及生物诊断技术领域，尤其涉及一种单纯疱疹病毒抗体唾液快速检测试纸条。

背景技术

单纯疱疹是由DNA病毒的单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus，HSV)所致。人类单纯疱疹病毒分为两型，即单纯疱疹病毒I型(HSV-I)和单纯疱疹病毒II型(HSV-II)。I型主要引起生殖器以外的皮肤、粘膜(口腔粘膜)和器官(脑)的感染。II型主要引起生殖器部位皮肤粘膜感染。此两型可用荧光免疫检查及细胞培养法鉴别。

人是单纯疱疹病毒的唯一自然宿主。病毒经呼吸道、口腔、生殖器粘膜以及破损皮肤进入体内，潜居于人体正常粘膜、血液、唾液及感觉神经节细胞内。原发性感染多为隐性，大多无临床症状或呈亚临床表现，仅有少数可出现临床症状。原发感染发生后，病毒可长期潜伏于体内。正常人群中约有50％以上为本病毒的携带者。HSV在人体内不产生永久免疫力，每当机体抵抗力下降时，如发热、胃肠功能紊乱、月经、妊娠、病灶感染和情绪改变时，体内潜伏的HSV被激活而发病。目前，检测以上传染病最常用的方法是免疫检测，此方法以抗原一抗体的特异性识别为基础，包括传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)和近来兴起的胶体金法两种。胶体金法分为免疫层析和免疫渗滤两种方式，其中以免疫层析法最为方便、快捷。

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，已得到较为广泛的应用，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试纸条的硝酸纤维素膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含有相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在硝酸纤维素膜上层析，再被包被的抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测线(T线)，通过检测线的有无实现对结果的判定。但是传统免疫层析技术大多是以血液为样本，血液中成分复杂，在检测前需要对血液进行处理，操作复杂，检测成本较高。

发明内容

本发明提供了一种单纯疱疹病毒抗体唾液快速检测试纸条，该试纸条可以以唾液为样品，解决了现有试纸条检测成本较高，不适合现场检测的缺点。

一种单纯疱疹病毒抗体唾液快速检测试纸条，包括底板，底板上依次粘贴有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸样垫，所述的胶体金垫上附着有胶体金标记的可与HSV-I和HSV-II的IgM抗体特异性结合的鼠抗人IgM抗体；所述的硝酸纤维素膜上包被有由人重组HSV-I抗原和HSV-II抗原构成的检测线以及可与所述的鼠抗人IgM抗体特异性结合的羊抗鼠二抗抗体构成的质控线。

本发明所述的HSV-I和HSV-II的IgM抗体是检测人是否感染单纯疱疹病毒的标记物，该标记物与通过血液检测人是否感染单纯疱疹病毒的标记物为同一标记物，为本领域技术人员所公知。所述的鼠抗人IgM抗体、人重组HSV-I抗原和HSV-II抗原、羊抗鼠二抗抗体均可通过现有传统方法制得。HSV-I的IgM抗体和HSV-II的IgM抗体是两种不同的抗体，鼠抗人IgM抗体可同时与HSV-I和HSV-II的IgM抗体结合。

优选地，所述的胶体金垫上附着有0.16～0.25μg/cm²的可与HSV-I和HSV-II的IgM抗体特异性结合的鼠抗人IgM抗体。

优选地，所述的胶体金垫可通过如下方法制备：

取胶体直径为15～35nm的胶体金溶液，调节pH值至8.0～8.2，以每100ml胶体金溶液计加入0.65～1.0mg所述的鼠抗人IgM抗体，搅拌后用牛血清蛋白封闭，离心去上清液，用胶体金溶液复溶至相同体积，将每毫升溶液均匀铺在20～40cm²玻璃纤维膜上，干燥后制得胶体金垫。

优选地，所述的检测线中人重组HSV-I抗原的含量为0.01～0.4μg/cm，人重组HSV-II抗原的含量为0.03～0.8μg/cm；所述的质控线中羊抗鼠二抗抗体含量为0.04～1.2μg/cm。

优选地，所述的检测线包被方法如下：

将所述的人重组HSV-I和人重组HSV-II抗原分别溶解在磷酸缓冲溶液中制得浓度为0.04～0.8mg/ml的两种溶液，将该两种溶液以体积比1∶3的比例混合，将混合溶液以1～1.5μl/cm的用量在硝酸纤维素膜的一端划线，干燥后即得检测线；

所述的质控线包被方法如下：

将所述的羊抗鼠二抗抗体溶解在磷酸缓冲溶液中制得浓度为0.04～0.8mg/ml的溶液，将该溶液以1～1.5μl/cm的用量在硝酸纤维素膜的另一端划线，干燥后即得质控线。