[发明专利]一种苏云金芽孢杆菌及其L-薄荷醇的制备方法

权利要求书

1.一种苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)，其特征在于保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.3189。

2.一种应用如权利要求1所述苏云金芽孢杆菌的L-薄荷醇的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)从斜面接种苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)于摇瓶培养种子液20～30小时；

2)将种子液以5～10％接种量接入1～2L发酵培养基培养20～30小时，培养温度为20～30℃；

3)将发酵培养后得到的培养液体在8,000～10,000g的离心力，4～6℃离心除去菌体得到含有胞外脂肪酶的发酵上清液，初始pH为7～8，用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至3～12；

4)在50ml～1000ml发酵上清液中加入50～700mmol/L八异构体外消旋薄荷醇酯进行不对称水解反应，得到L-薄荷醇及未水解的薄荷醇酯，其反应温度为20～40℃；

5)用1～3倍体积的正己烷萃取，得到的L-薄荷醇及薄荷醇醇酯混合物采用柱状色谱分离，洗脱液为1∶8～1∶10的乙酸乙酯和正己烷混合液，分离，在70～80℃下低压蒸馏除去溶剂，得到L-薄荷醇。

3.根据权利要求2所述的一种L-薄荷醇的制备方法，其特征在于所述的八异构体外消旋薄荷醇酯为：乙酸薄荷醇酯或丙酸薄荷醇酯。