[发明专利]灯盏细辛药材的质量控制方法

权利要求书

1.一种灯盏细辛药材的质量控制方法，其特征在于：该方法包括灯盏细辛药材的指纹图谱检测方法和含量测定方法；其中指纹图谱检测方法是采用UPLC测定，它具有24个特征峰，归属了8个特征峰；含量测定方法是采用UPLC-PDA法同时测定灯盏细辛中所含的飞蓬苷、绿原酸、灯盏花苷、野黄芩苷、3，4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、灯盏甲素、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸全部或部分成分的含量。

2.根据权利要求1所述的灯盏细辛药材的质量控制方法，其特征在于所述的指纹图谱检测方法由以下步骤组成：

(1)供试品溶液的制备：精密称定灯盏细辛药材粉末约0.25～0.5g，精密加入50％甲醇50mL，称定重量，加热回流1～3h，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液用微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

(2)色谱条件：ACQUITY BEH为色谱柱；乙腈(A)-0.1％磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱；流速为0.2～0.5mL·min^-1；检测波长为290～300nm；进样量为1～3μL。

(3)标准指纹图谱的建立：通过对10批次以上灯盏细辛药材UPLC指纹图谱的测定，确定其共有指纹特征，并经中药指纹图谱相似度评价软件拟合建立灯盏细辛药材的标准指纹图谱。

(4)指纹图谱的质量控制：将样品的UPLC指纹图谱与标准指纹图谱比较。经中药指纹图谱相似度评价软件计算相似度应不得小于0.9。

3.根据权利要求1所述的灯盏细辛药材的质量控制方法，其特征在于所述的含量测定方法由以下步骤组成：

(1)对照品溶液的制备：精密称取对照品飞蓬苷、绿原酸、灯盏花苷、野黄芩苷、3，4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、灯盏甲素、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸中的几个或全部适量置容量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品贮备液；精密吸取对照品贮备液，置容量瓶中并加50％甲醇定容，制成混合对照品溶液。

(2)供试品溶液的制备：精密称定粉碎过40目筛的灯盏细辛样品约0.5g，精密加入50％甲醇50mL，称定重量，加热回流2h，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

(3)色谱条件：色谱柱：ACQUITY BEH C₁₈(2.1mm×150mm，1.7μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸(B)，梯度洗脱(0min，2％A；1.5min，5％A；1.6min，8％A；6min，15％A；6.1min，18％A；8.5min，19％A；10min，28％A；13min，31％A；14min，80％A；15.1min，100％；16min，100％)；流速：0.35mL·min^-1；柱温40℃；PDA检测器，检测波长为260，326，335nm。

(4)测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1～3μL，注入超高效液相色谱仪，测定，记录16min的色谱图，即得。

4.根据权利要求2所述的灯盏细辛药材指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(2)的色谱条件为色谱柱：ACQUITY BEH C₁₈(2.1mm×150mm，1.7μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸(B)，梯度洗脱(0min，2％A；1.5min，5％A；1.6min，8％A；6min，15％A；6.1min，18％A；8.5min，19％A；10min，28％A；13min，31％A；14rmin，80％A；15.1min，100％；16min，100％)；流速：0.35mL·min^-1；柱温40℃；检测波长：290nm；进样量：1μL。记录16min的色谱图，即得到所需指纹图谱。