[发明专利]嗜热毁丝霉菌株及其在产角蛋白酶方面的应用有效
申请号: | 200910102968.4 | 申请日: | 2009-12-23 |
公开(公告)号: | CN101717727A | 公开(公告)日: | 2010-06-02 |
发明(设计)人: | 梁建东;韩燕峰;梁宗琦;张继伟;杜文 | 申请(专利权)人: | 贵州大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/58;C12R1/645 |
代理公司: | 贵阳东圣专利商标事务有限公司 52002 | 代理人: | 袁庆云 |
地址: | 550025 贵州省*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 嗜热毁丝 霉菌 及其 角蛋白 方面 应用 | ||
1.一种嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)菌株GZUIFR-H94.1, 其特征在于所属菌株保藏号为CCTCC NO:M 209140。
2.如权利要求1所述的嗜热毁丝霉菌株GZUIFR-H94.1在产角蛋白酶 方面的应用。
3.如权利要求1所述的嗜热毁丝霉菌株GZUIFR-H94.1产角蛋白酶的 方法,包括以下步骤:
(1)培养基
摇瓶发酵培养基:鸡毛粉20.10g,尿素0.98g,NaCl 5g,K2HPO46g, KH2PO41g,水1000mL,初始pH为7.9;
(2)液体发酵培养
将本发明的菌株接种在含固体PDA培养基的培养皿中,38℃培养3天, 用直径7mm的打孔器打空,然后将菌丝块接种到装有50mL复筛液体培 养基的250mL三角瓶中,每瓶接3孔菌丝块,每组作3个重复,放入38 ℃摇床中,140rpm保温静止培养,测定酶活力;
(3)粗酶液的制备
孢子液的制备:取4℃冰箱保存的菌种,用接种环挑取少量菌丝,用划 线法将其接种于PDA培养基上,38℃培养;长好后,用灭菌的0.05%的 Tween-80轻轻洗出平板表面的分生孢子,并在无菌条件下用16层纱布过滤, 所得孢子悬液以血球计数板计数后置于4℃保存备用;
粗酶液的提取:取适量的孢子液加入内装50mL发酵液的250mL三角 瓶中,于38℃,120rpm摇床上培养;6天后取发酵液,4000rpm离心5min, 然后再用快速定性滤纸过滤,取滤液即得。
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