[发明专利]基于量子点的核酸传感器及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.基于量子点的核酸传感器，其特征在于：包括固相支持物和固定在固相支持物表面的寡核苷酸探针阵列，所述寡核苷酸探针阵列由一种不含自身互补序列的寡核苷酸探针组成，所述寡核苷酸探针一端标记量子点并通过量子点固定在固相支持物的表面，所述寡核苷酸探针与量子点之间以及量子点与固相支持物之间均通过生物素-亲和素系统进行偶联。

2.根据权利要求1所述的基于量子点的核酸传感器，其特征在于：所述量子点选自MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、ZnO、ZnS、ZnSe、ZnTe、SrS、SrSe、SeTe、CdS、CdSe、CdTe、BaS、BaSe、BaTe、HgS、HgSe、HgTe、PbSe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、CdS/PbS、CdS/Cd(OH)₂、CdSe/CuSe、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CdS、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdSe/HgTe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/ZnSe、InAs/CdSe、InAs/InP、ZnS:Mn、ZnS:Cu、CdS:Mn和CdS:Cu中的任一种，或以上述任一种为核、二氧化硅为壳的核壳型量子点。

3.权利要求1所述的基于量子点的核酸传感器的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

a、制备链霉亲和素标记的量子点；

b、制备不含自身互补序列且一端生物素标记的寡核苷酸探针；

c、将步骤b所得一端生物素标记的寡核苷酸探针与步骤a所得链霉亲和素标记的量子点通过生物素-链霉亲和素的特异性结合进行偶联，制备一端量子点标记的寡核苷酸探针；

d、将固相支持物的表面用生物素标记，再利用生物素-链霉亲和素的特异性结合将步骤c 所得一端量子点标记的寡核苷酸探针通过量子点固定至固相支持物的表面，同时固定多个寡核苷酸探针至形成阵列，即得核酸传感器。

4.权利要求1所述的基于量子点的核酸传感器的检测方法，包括以下步骤：

a、制备一端荧光淬灭基团标记的待测核酸样品；

b、将步骤a所得一端荧光淬灭基团标记的待测核酸样品与核酸传感器表面的寡核苷酸探针进行杂交反应，当寡核苷酸探针和待测核酸样品中的特定核酸序列杂交后，量子点和荧光猝灭基团彼此靠近并发生FRET；

c、以一定波长的激发光照射杂交反应后的核酸传感器，通过杂交前后量子点荧光强度的变化进行待测核酸样品中特定核酸序列的检测。

5.根据权利要求4所述的基于量子点的核酸传感器的检测方法，其特征在于：所述荧光淬灭基团选自5-FAM、6-FAM、FITC、罗丹明B、罗丹明101、罗丹明123、罗丹明640、罗丹明6G、RRX、TAMRA、TRITC、Alexa350、Alexa488、Alexa555、Alexa568、Alexa594、Alexa647、Alexa680、Cy2、Cy3、Cy5、BHQ-1、BHQ-2、BHQ-3、LC-Red640、LC-Red705、TR、AMCA、DABCYL、SYBR Green和纳米金中的任一种。

6.基于量子点的核酸传感器，其特征在于：包括固相支持物和固定在固相支持物表面的寡核苷酸探针阵列，所述寡核苷酸探针阵列由一种分子信标组成，所述分子信标的一端标记量子点并通过量子点固定在固相支持物的表面，另一端标记荧光猝灭基团，所述分子信标与量子点之间以及量子点与固相支持物之间均通过生物素-亲和素系统进行偶联。