[发明专利]一种蒲葵子的抗肿瘤有效组分的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤的中药有效组分，具体而言是涉及一种蒲葵子抗肿瘤有效组分的制备方法，该有效组分主要含有小麦黄素、芹菜素两种化合物。

背景技术

肿瘤是威胁人类健康和生命的严重疾病之一，每年死于肿瘤的患者居各类死亡原因的第二位，仅次于心血管疾病，而且肿瘤的发病率呈上升趋势，给个人、家庭和社会带来了巨大的经济和精神负担。据WHO报导目前欧美每年诊断出的癌症新患者达250万，我国每年死于癌症的患者超过80万，专家预测世界抗癌药物的市场年递增13％。因此，研发新型抗肿瘤药物具有非常重要的社会效益和经济效益。长期以来，国际社会花费巨资用于研究治疗癌症的新药。然而由于化疗药物固有的毒副作用，使其在临床应用受到诸多限制，寻找高效低毒的抗癌药物以及抗癌辅助药物是当前肿瘤研究的重要内容。而传统中草药在这方面具有显著的优势，使得各国学者把注意力逐渐转向了中草药领域。欧共体对草药进行了统一立法，加拿大和澳大利亚等国草药地位已经合法化，美国政府也起草了植物药管理办法，这些为中药作为治疗药进入国际医药市场提供了良好的国际环境。我国药用生物资源十分丰富，其生理活性物质是研究和发现新药的先导化合物，是开发新药的天然宝库。

蒲葵子，为植物棕榈科蒲葵Livistona chinensis R.Br.(别名：扇叶葵子、葵扇木子、蒲葵子)的种子。蒲葵为棕榈科葵属常绿乔木，一种野生或人工栽培的常绿乔木。它主产于福建、台湾、广东等地。秋冬果实成熟时采收、晒干，生用。《岭南采药录》、《广州植物志》、《广西中兽医药植》、《陆川本草》等均有收载，其性味平、淡，具有败毒抗癌、消瘀止血之功效。研究表明已知的化学成分：山萘酚-4′-甲醚、牡荆素、β-谷甾醇、豆甾醇、正二十六碳醇(刘志平等，广西植物，2007，27(1)：140-142)。薯蓣皂苷元、β-胡萝卜苷、小麦黄素、芹菜素(刘志平等，中草药，2007，38(2)：178-180)。陈屏等人首次分离得到以下五种化合物：表缅茄儿茶精、表儿茶素、正三十一烷醇、去氢紫堇碱(陈屏等，中草药，2007，38(5)：665-667)。

蒲葵子含药血清对肉瘤细胞(S180)、肝癌细胞(H22)有明显的抑制作用(曾春晖等，广西中医药，2007，30(1)：58-59)。蒲葵子乙醇提取物对人宫颈癌细胞株(Hela)有显著的抑制作用，且具有明显的计量依赖关系(秦盛莹等，西北药学杂志，2007，22(1)：16-18)。蒲葵子乙醇提取物进行化学成分GC-MS分析，主要成分为脂肪酸、脂肪酸酯、植物甾醇及长链烷烃等，且对宫颈癌细胞(Hela)、人胃癌细胞(SGC7901)、人肝癌细胞(Bel7402)均有一定的抑制作用(朱岳麟等，化学与生物工程，2007，24(10)：35-37)。蒲葵子醇提物对蛋白激酶C的抑制率可达到66.6％，降低药物浓度抑制作用减弱(黄才等，中草药，1995，26(8)：415-418)。国内也有利用蒲葵子经破细胞壁后提取的原粉制备抗癌剂的报道(丁庆等，CN 97 100 103.0)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蒲葵子具有抗肿瘤作用的有效组分。

本发明的目的在于提供一种蒲葵子具有抗肿瘤作用的有效组分的制备方法。

本发明以如下的技术方案予以实施：

将自然晾干的蒲葵子粉碎，加溶媒加热提取得提取液，将提取液浓缩至干，得蒲葵子粗提取物。粗提物依次分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取。乙酸乙酯萃取液减压浓缩至干，经过聚酰胺层析柱，用水和乙醇洗脱，得到洗脱液，将洗脱液干燥后得样品；再经过硅胶柱层析，用氯仿和甲醇洗脱，得到有效组分。

(1)将自然晾干的蒲葵子粉碎后，加入1～3倍60-95％的乙醇，60～100℃加热回流提取，至少提取一次，每次提取时间为1～4小时，得提取液，过滤分离得固相(药渣)和液相(乙醇提取液)；

(2)液相(乙醇提取液)蒸馏回收乙醇，得到蒲葵子粗提物深红色的浸膏A；

(3)浸膏A用适量的水混悬，然后依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回收石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇，得到石油醚浸膏B、二氯甲烷浸膏C、乙酸乙酯浸膏D和正丁醇浸膏E。

(4)乙酸乙酯浸膏D用聚酰胺层析柱，用水-乙醇(依次为纯水、30％、70％乙醇)作为流动相，分别收集合并各种洗脱液，洗脱液浓缩后得样品；再经过硅胶柱层析，用氯仿∶甲醇(5～13∶1)洗脱，浓缩后得到有效组分。

本发明的蒲葵子的有效组分可在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的优势在于：