[发明专利]联合应用全仿生消化技术和细胞膜仿生固相萃取技术的中药提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药提取方法，具体地涉及一种联合应用全仿生消化技术和细胞膜仿生固相萃取技术的中药提取方法。

背景技术

中药的成分异常复杂，且多种有效成分在进入人体后相互配合、协同作用，而后起到疾病的治疗作用。传统的提纯分离技术(如煎煮法、回流、浸渍、渗漉等)和现代中药提纯分离技术(如超微粉碎技术、超临界萃取技术、逆流动态提取技术、吸附分离纯化技术、膜分离技术、多效薄膜浓缩干燥技术、真空带式干燥技术、计算机控制技术等)均沿用“纯粹”、“传统”的物理及化学手段，与吸收入人体的中药有效成分的协同作用无关，因此易破坏中药有效成分的结构或组成，难以将中药中含有的有效成分完全提取出来。

仿生提取法(Bionic Extration method)则与上述提纯方式不同，它是从生物药剂学的角度将整体药物研究法与分子药物研究法相结合仿生提取法，它特别适用于中药复方中有效成分的提取，中药复方是中医临床用药的一大特点，其化学成分非常复杂，很难用现代提纯分离技术提纯的某一成分的药效和药代参数来代表整个中药复方。基于中药复方中部分有效成分已知，部分有效成分未知的现实，SBE法坚持“有成分论，不唯成分论，重在基体的药效学反应”的基本原则(郁威，中药提取分离技术原理与应用，中医药出版社：2005，364-369)，由于中药大多使用口服吸收，因此，仿生提取法主要模仿口服药物在口腔、胃肠道中的吸收环境，以得到有效成分含量高的活性中药提取液。

但是，现有的仿生提取技术仅仅停留在将中药中的有效成分萃取到胃、肠等仿生液中，而上述仿生提取液存在溶液量大、口感差、易发生胃肠不适等的问题，无法像水煎剂一样直接口服使用；当然，也可以将其浓缩、或将其烘干，但是，由于上述仿生液中带有大量的生物酶及一系列成分复杂的化合物，在加热的过程中，其中所含有的有效成分易发生副反应(如水解反应等)，导致有效成分的含量降低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种联合应用全仿生消化技术和细胞膜仿生固相萃取技术的中药提取方法，以解决现有技术中存在的上述问题。本发明联合应用全仿生消化技术和细胞膜仿生固相萃取技术，反应条件温和，可保持天然产物构象及有效成分原有药效。

本发明提供的技术方案如下：

联合应用全仿生消化技术和细胞膜仿生固相萃取技术的中药提取方法，其特征在于，它包括以下的步骤：

1)在一容器中加入中药，而后加入模拟唾液，在36～38℃下振荡3～6分钟；

2)而后向上述容器中加入模拟胃液，在36～38℃下继续振荡1～4小时，获得中药的体外胃仿生消化液；

3)向步骤2中获得的体外胃仿生消化液中加入模拟十二指肠液和模拟胆汁，在36～38℃下继续振荡5～10小时，而后使用孔径为0.45μm的滤膜抽滤，获得体外胃肠全仿生消化液；

4)取蛋黄卵磷脂，将其溶于氯仿中，获得蛋黄卵磷脂的氯仿溶液；将上述溶液移入具塞的圆底烧瓶中，在旋转蒸发器上抽真空旋转蒸发，使之形成均匀的多层脂质膜，而后向其中充入氮气以防止多层脂质膜被氧化；向其中加入步骤3中获得的体外胃肠全仿生消化液，将其加入水浴恒温振荡器中，在36～38℃下振荡，使多层脂质膜全部进入全仿生消化液中，而后在-80～-71℃冷冻1h，在36～38℃下融化，反复冻融3次后，得到含单层脂质体的冻融液，该单层脂质体中负载有中药有效成分群；

5)依次用孔径为0.45μm和0.22μm的滤膜抽滤冻融液，从溶液中分离获得负载有中药有效成分群的单层脂质体(单层脂质体粒径为0.3～0.35μm)。

本发明建立体外全仿生消化技术并应用于中药提取的前处理，即一句化学仿生(人工胃、人工肠)与医学仿生(酶的作用)原理，建立人体仿生消化体系：在不同消化阶段按照不同消化器官在一定时间内分泌出的消化液的成份和量，加入相应的仿生消化液，再根据中药不同剂型在人体消化器官中的排空时间合理安排各个阶段的消化时间，并模拟消化器官有规律的蠕动，建立中药材和中药水煎液的模拟消化过程，以此来获得全仿生消化液，该全仿生消化液更接近药物在体内达到平衡后的有效成分群，合乎中医药理论的系统观、整体观；另外，鉴于消化管和血管间的生物膜是类脂质膜，因此，本发明建立细胞膜仿生萃取技术，提取可与模拟细胞膜(即单层脂质体)结合的有效成分群，达到中药成份的活性化、浓缩化，并具有可直接吸收的特点。模拟唾液、模拟胃液，模拟十二指肠液和模拟胆汁的组成成分及制备方法可如表1中所示：

表1 模拟唾液、模拟胃液、模拟十二指肠液及模拟胆汁的组成成份及制备方法