[发明专利]一种香蕉枯萎病菌快速分离鉴定培养基

说明书

所属技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其是涉及一种香蕉枯萎病菌快速分离鉴定培养基。可用于香蕉组培苗苗期病原鉴定，亦可用于土壤中分离香蕉枯萎病原菌，在农业生产上具有实际意义。

背景技术

目前，香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporumf.sp.cubense(FOC)侵染引起的一种世界性土传维管束病害，近年来在我国香蕉主产区持续暴发，造成严重损失。香蕉枯萎病菌根据鉴别寄主的不同分为4个生理小种，其中4号生理小种几乎对所有香蕉栽培种均致病，严重威胁香蕉产业的可持续健康发展。迄今为止，还没有一种理想的药剂可以有效防治该病，因此加强香蕉枯萎病的检验检疫工作，寻找有效的防治方法，控制该病的蔓延和危害迫在眉睫，而研制出一种快速检测香蕉枯萎病菌的技术方法将为检验检疫提供有力的技术支持。土壤中存在着大量的微生物，所以从土壤中特异性分离某一微生物是非常困难的。选择性培养基必须具备极强的特异性选择能力，才有实际应用价值。香蕉枯萎病是一种毁灭性病害，为了控制其扩散蔓延，有必要研制出实用的早期快速检测技术，采取有效的防治措施，避免可能造成的重大经济损失。

关于尖孢镰刀菌的选择性培养基，国内外已有一些报道。虽然国内学者韩宝坤，杜艳华等，在植物病理学报，2001，31(4)公开了在非无菌操作下分离尖孢镰刀菌的培养基，但是，用于从土壤中计数尖孢镰刀菌时极易被杂菌污染，在非无菌操作不能从土壤中分离香蕉枯萎病菌的培养基，达不到大量、快速检测病原菌的目的；国外学者除把葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物作为镰刀菌生长的基本营养物质外，并添加许多微量元素，这些培养基的制作成本普遍偏高，需经高温灭菌，而且所有操作须在无菌条件下进行，这给大量快速检测病原菌带来不便，效果往往不太理想。

发明内容

基于上述原因，为了克服以上现有技术存在的不足，本发明专利提供一种香蕉枯萎病菌快速分离鉴定培养基。

本发明的目的是提供一种不仅能在非无菌操作下从感病植物组织中分离尖孢镰刀菌，而且能较好的从土壤中分离香蕉枯萎病菌的培养基，从而达到大量、快速检测病原菌的目的。

本发明是采用以下技术方案实现的：

一种香蕉枯萎病菌快速分离鉴定培养基，该培养基为一组组合物，其特征在于每1000ml水溶液含有下列组分的培养基：

马铃薯              180～220g，五水硫酸铜    0.4～0.6g，

七水硫酸镁          0.5～0.7g，磷酸二氢钾    0.08～0.12g，

琼脂                18～20g，  95％酒精溶液  10～15ml，

75％敌克松结晶粉    2.5～3.0g，硫酸链霉素    0.5～0.8g，

较佳地，该培养基为一组组合物，其特征在于每1000ml水溶液含有下列组分的培养基：

马铃薯              200g，五水硫酸铜    0.5g，

七水硫酸镁          0.6g，磷酸二氢钾    0.1g，

琼脂                19g， 95％酒精溶液  10ml，

75％敌克松结晶粉    3.0g，硫酸链霉素    0.75g，

本发明的培养基与其它常见分离培养基相比具有的优点是：本发明的培养基不但不需无菌操作，成分简单、而且检测率显著、抑菌效果好、病菌在其上生长快、菌落典型，是一种较为理想的选择性培养基。

具体的实施例

制备实施例一  本实施例的培养基成分原料配比组成：

马铃薯              180g； 五水硫酸铜  0.4g；七水硫酸镁    0.5g；

磷酸二氢钾          0.08g；琼脂        18g； 95％酒精溶液  10ml；

75％敌克松结晶粉    2.5g； 硫酸链霉素  0.5g；水溶液        1000ml。

本实施例培养基的制备方法为：

1、取去皮马铃薯180g切成小块状置入锅中，向锅中加入700ml水溶液并熬煮20分钟，取滤液备用；

2、向步骤1制得的备用滤液中加入五水硫酸铜0.4g、七水硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾0.08g、琼脂18g煮溶，凉至45℃时分别加入95％酒精溶液10ml、75％敌克松结晶粉2.5g、硫酸链霉素0.5g，然后加入水溶液补足1000ml，调pH至5.8，搅拌均匀，直接倒平板，室温放置10分钟后成品。

制备实施例二  本实施例的培养基成分原料配比组成：