[发明专利]靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱复合物的制备方法、其产品及含有该产品的注射剂

说明书

技术领域：

本发明涉及一种靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱复合物的制备方法，具 体涉及氯化两面针碱与单壁碳纳米管的水溶性复合物的制备方法；本发明 还涉及由这种方法制得的靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱复合物以及以该 产品为活性成分的注射剂。

背景技术：

氯化两面针碱(1，英文名nitidine chloride)，结构如下述1式所示， 为苯并菲啶类生物碱，黄色或淡黄绿色针状结晶。1980年，黄志勋等(化 学学报，1980，38(6)：535.)从芸香科花椒属植物两面针(Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC)根的干燥粉末中分离得到氯化两面针碱以及其它5 种生物碱，并通过动物实验发现氯化两面针碱能够延长艾氏腹水癌小鼠的 生命，对小鼠艾氏腹水癌的抑制率达到279％，对小鼠肝癌腹水也有效。氯 化两面针碱具有广谱的抗肿瘤活性，对Lewis肺癌、鼻咽癌、肝癌、乳腺 癌和慢性细胞型白血病等均有治疗效果。

我们对氯化两面针碱的抗肿瘤活性进行了初步的研究，发现其抗癌活 性很强，对口腔上皮癌KB细胞(时珍国医国药，2007，9：2104)、乳腺癌 MDA-MB-231、肝癌bel-7402、鼻咽癌ECV2和7111(华西药学杂志，2007， 22(5)：514)、舌癌Tca8113和肺癌spc-a-1(中国药理学通报，2007，23(2)： 279)等均有明显的抑制率，其IC₅₀为0.28～2.7μg/mL，且对耐药株KBV200 (中国药理学与毒理学杂志，2007，21(6)：512)也有较强的杀伤作用，能 够引起肿瘤细胞凋亡，在抗肿瘤治疗方面具有非常广泛的开发利用价值和 应用前景。但是，氯化两面针碱存在水溶性差(0.2mg/mL)和毒副作用 较强的缺点，这就极大地限制了氯化两面针碱在抗肿瘤治疗药物方面的研 究、开发和应用。

碳纳米管(carbon nanotubes，CNT)是一类具有完美石墨结构的管 形碳材料，包括单壁碳纳米管(single-walled CNT，SWNT)和多壁碳纳 米管(multi-walled CNT，MWNT)，均具有优异的导电性、电磁特性和力 学性能，在储氢和光电转换功能材料等方面的应用得到了极大的发展；并 且由于碳纳米管在细胞和生物体内具有很低的细胞毒性和很好的生物兼 容性(Nature，2008，3：216)，这使得它在生物和医学领域获得了广泛 的应用研究，例如在生物传感器、药物载体、体内成像和分子诊断以及DNA 调整等方面的应用。其中，单壁碳纳米管(SWNT)的外径范围为0.5～3.0 nm，长度范围为1.0～15.0μm，经过氧化或超声剪裁后，可以获得更短 的单壁碳纳米管。经修饰后的单壁碳纳米管可以增加药物在水溶液中的溶 解度，而且可以实现该药物对肿瘤组织的被动靶向给药，降低毒副作用。 目前有关抗癌药氯化两面针碱与单壁碳纳米管的水溶性复合物及其制备 方法，尚未有公开的成果和技术报道。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是：针对现有技术中抗肿瘤药物氯化两面针 碱存在的水溶性差和毒副作用较大的不足，提供一种溶解度大、毒副作用 小的靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱复合物的制备方法及其产品，以及含有 该产品的注射剂。

本发明靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱复合物的制备方法，将氯化两面 针碱进行预处理得到羧酸修饰的氯化两面针碱，然后用双亲性聚合物对裁 剪至20～500nm长的单壁碳纳米管的外壁进行非共价功能化修饰；再将 羧酸修饰的氯化两面针碱与功能化修饰后的单壁碳纳米管通过酯化和酰 胺化反应进行偶联，即得到靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱与单壁碳纳米管 的水溶性复合物。

优选的靶向性抗肿瘤药氯化两面针碱复合物的制备方法为：包括以下 步骤，其中步骤(1)和步骤(2)可以不分前后：

(1)氯化两面针碱的预处理

①在惰性气体保护下，将氯化两面针碱加入到浓的氢卤酸中，使氯化 两面针碱的浓度为1.0×10^-4～1.0mol/L，边搅拌边升温到50～200℃反 应1～72h，反应结束后，以氨水调节混合溶液的pH值为碱性，用二氯甲 烷溶剂对反应混合物反复萃取三次，将水相溶剂蒸干，剩余物用甲醇或乙 醇溶解，加盐酸调节pH值为2～3，放置，析晶，即得到C-8和/或C-9 位置的甲氧基被羟基取代的氯化两面针碱晶体；