[发明专利]高大毛霉催化转化肉桂酸生成天然苯乙酮和α-苯乙醇的方法无效
申请号: | 200910113911.4 | 申请日: | 2009-03-11 |
公开(公告)号: | CN101570766A | 公开(公告)日: | 2009-11-04 |
发明(设计)人: | 刘雄民;马丽;李伟光;沈芳;甘正华 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C12P7/26 | 分类号: | C12P7/26;C12P7/22;C12R1/785 |
代理公司: | 广西南宁明智专利商标代理有限责任公司 | 代理人: | 黎明天 |
地址: | 530004广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高大 毛霉 催化 转化 肉桂 生成 天然 苯乙酮 乙醇 方法 | ||
1.高大毛霉催化肉桂酸生成α-苯乙醇的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)接种和培养高达毛霉菌株:用接种环挑取高大毛霉接到察氏斜面上,在察氏斜面培养 基中生长2天,菌丝体呈白色,有光泽,然后从察氏斜面上挑取生长良好的菌体接到培养液中, 30℃下往复摇床培养2天,5000rpm离心30分钟,菌体用无菌水洗涤一次,再离心后获菌体用 于反应;
察氏斜面培养基各成份的重量百分比为:葡萄糖4%,酵母膏3%,蛋白胨2%,琼脂 4%,NaCl 0.8%,K2HPO42%,pH 7.3;
培养液各成份的重量百分比为:葡萄糖5%,酵母膏1%,K2HPO41%,pH 7.3;
上述培养基和培养液均在120℃和压力下灭菌20分钟;
或者,用接种环挑取高大毛霉菌体接到察氏斜面上,在察氏斜面培养基中生长2天,菌丝 体呈白色,有光泽,然后从察氏斜面上挑取生长良好的菌体接到培养液中,30℃下往复摇床 培养2天,5000rpm离心30分钟,菌体用无菌水洗涤一次,再离心后获菌体用于反应;
所述的察氏斜面培养基各成份的重量百分比为:葡萄糖2%,酵母膏1%,蛋白胨1%, 琼脂2%,NaCl 0.5%,K2HPO41%,pH5.8;
所述的培养液各成份的重量百分比为:葡萄糖5%,酵母膏1%,K2HPO41%,pH 5.8;
上述培养基和培养液均在120℃和压力下灭菌20分钟;
(2)肉桂酸转化成苯乙酮:取新鲜培养的上述高大毛霉湿菌体50g,悬浮于1000ml10%葡萄 糖液中,加入10g肉桂酸,往复摇床反应,转速180转/分,HPLC跟踪,2天后反应完全,过滤 除去菌体,反应液用固体氯化钠饱和后,用400ml乙酸乙酯提取,合并有机相,无水硫酸钠干 燥,过滤,减压蒸除溶剂,获8g,98%纯度的苯乙酮,得率80%;
(3)α-苯乙醇的生成:取新鲜培养的高大毛霉湿菌体50g,悬浮于1000ml5%-10%葡萄糖 液中,加入苯乙酮9g,往复摇床反应,转速150转/分,HPLC跟踪,1.5天后反应完全,过 滤除去菌体,反应液用固体氯化钠饱和后,用400ml乙酸乙酯提取,合并有机相,无水硫酸 钠干燥,过滤,减压蒸除溶剂,获得8.3g(S)-α-苯乙醇,得率为92%,[α]D25-16°,(C1.0, C2H5OH),光学纯度ee值为96%。
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