[发明专利]一种珍珠水解液的制备方法有效
申请号: | 200910114409.5 | 申请日: | 2009-09-18 |
公开(公告)号: | CN102018727A | 公开(公告)日: | 2011-04-20 |
发明(设计)人: | 孙步祥;汤凌志;李霞;唐丽娟;陈振鹏;吴柏峰 | 申请(专利权)人: | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A61K35/56 | 分类号: | A61K35/56;A61K8/98;C12P1/00 |
代理公司: | 桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107 | 代理人: | 苏家达 |
地址: | 541100 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 珍珠 水解 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种水解液的制备方法,具体涉及珍珠水解液的制备方法。
背景技术
珍珠是名贵的中药材,珍珠是母贝的外套膜和珍珠囊的表皮细胞所分泌的珍珠质而形成的。珍珠的主要成份是碳酸钙,约占总量的82~93%,此外,珍珠还含有4~14%的壳角蛋白质和2~4%的水分,以及十几种氨基酸和28种微量元素,其中包括硒、锗等抗衰物质。壳角蛋白能在适当的条件下解离成氨基酸。氨基酸是组成蛋白质的基本单位,而蛋白质是我们机体的生命基础,是调节生理机能,供给热量所必需的物质。李时珍在《本草纲目》中记载:“(珍珠)定惊,清肝除翳,收敛生肌”,即可以清热解毒,愈合创伤,助长皮肉,消炎明目。现代医学发现珍珠中富含氨基酸,咖啡因和多种人体必备的微量元素,能积极参与人体的新陈代谢,可以养颜美容,增白保湿,防止衰老,以及治疗口腔溃疡、神经衰弱和癔症等。目前已广泛应用于化妆品、保健品之中。
然而珍珠难溶于水,内食和外用,人体一般只能吸收极少量的部分。目前利用珍珠的有效成分主要是以珍珠水解液的形态进行,现有的珍珠水解液的制备方法主要是用无机酸或有机酸将珍珠粉溶化,再加酶进行水解,得到水解液,如公开号为CN1107335的中国发明专利公开了一种一种酶解珍珠粉的产品及方法,该发明采用木瓜蛋白酶在一定的反应条件下对壳角蛋白质进行酶解,使原来不易被人吸收的珍珠粉中的壳角蛋白质酶解为人体可吸收的二十种氨基酸。但该方法所得的珍珠水解液中各成分的分子量均较大,不易被人体吸收,且产品的收率不高。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种产品收率高的珍珠水解液的制备方法。采用这种方法制得的珍珠水解液中分子量小于1000Da的成分占90%以上。
本申请中所出现的产品收率是指:以产品珍珠水解液中0.2mg/ml的含氮量为基准,得到珍珠水解液的质量与得到该质量的水解液所投入的珍珠粉原料用量的比值。
本发明所述珍珠水解液的制备方法,包括以下步骤:
1)取珍珠粉置于盐酸水溶液中,搅拌,直至反应完全,用氨水调节该混合液的pH值至中性,离心,得沉淀A;
2)沉淀A用纯净水溶解,再以氨水调节其pH值为7.5~8.5,离心,得沉淀B;
3)沉淀B用纯净水溶解,加入酶进行酶解,酶解液离心,得上清液和沉淀C;其中,
所述的酶为蜗牛蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物,酶的加入量为沉淀B湿重的0.3~1.05%,其中蜗牛蛋白酶和木瓜蛋白酶分别占酶总用量的10~20%和80~90%,酶解的温度为50~55℃,时间为2~4小时;
4)将沉淀C用纯净水溶解加酶进行二次酶解,离心,收集上清液;其中,
所述的酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的混合物,酶的加入量为沉淀B湿重的0.2~0.45%,其中胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶分别占酶总用量的10~25%、15~20%和60~70%,酶解的温度为50~55℃,时间为4~7小时;
5)合并上清液,煮沸,用孔径为1~3nm的纳滤膜过滤,即得。
上述方法采用特殊的酶解工艺,将胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和蜗牛蛋白酶按照特定的搭配组合使用,使得对珍珠粉中的壳角蛋白质进行充分的溶解作用,使水解液中的含氮量增加,提高了产品的收率;而且使得到的水解液中含有丰富的氨基酸和小分子蛋白,其中分子量小于1000Da的成分占90%以上,更利于人体的吸收。对由该方法制得的珍珠水解液中氨基酸的分析结果如下:
上述方法中,
步骤1)中,盐酸水溶液的体积用量(升)为珍珠粉重量(千克)的8~10倍,其摩尔浓度为2~4mol/L。
为说明本发明采用特殊的酶解工艺可得到更高的产品收率,申请人分别采用本申请所述方法与现有技术(CN1107335)所述方法作了实验对比,具体实验条件及结果如下:
(一)、按公开号为CN1107335的中国发明专利所述方法进行实验:
取乳酸3.2升,加入蒸馏水42升,充分混匀后成为乳酸溶液,将1千克珍珠粉分次加入乳酸溶液中,边搅拌边加入,待反应完成后,离心,得上清液和不溶部分,上清液即为珍珠活性钙及微量元素部分,不溶部分即为珍珠壳角蛋白质。取湿的壳角蛋白质1千克,加入蒸馏水10升在38℃条件下,加入15克(相当于壳角蛋白质重量的1.5%)木瓜蛋白酶,1克盐酸半胱氨酸,1克乙二桉四乙酸二钠盐,在38℃条件下酶解5小时,离心,得酶解珍珠液,灭菌后即为产品。
经检测上述酶解珍珠液的收率为23.29%。
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