[发明专利]金莲清热颗粒中牡荆苷的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及金莲清热颗粒的质量控制方法，具体地说是涉及金莲清热 颗粒中牡荆苷的含量测定方法。

背景技术

金莲清热颗粒是以金莲花、大青叶为主药，通过加水煎煮，过滤，浓 缩，干燥，加入适量的糊精和甜味剂后制成的颗粒剂，其中金莲花作为金 莲清热颗粒的君药之一，具有清热解毒、抗菌消炎的功效，其主要成分为 牡荆苷、荭草苷等。准确测定金莲清热颗粒中牡荆苷的含量，是有效控制 金莲清热颗粒内在质量的有效手段之一。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作简便，结果准确，灵敏度高，重现性 好，回收率好，干扰好，且阴性对照溶液对测定无干扰，可以作为控制金 莲清热颗粒内在质量的有效方法的金莲清热颗粒中牡荆苷的含量测定方 法。

本发明的技术方案为：

一种金莲清热颗粒中牡荆苷的含量测定方法，其特征在于采用高效液 相色谱法，具体步骤为：

(1)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4％乙酸 胺溶液15∶85为流动相，检测波长为340nm，理论板数按牡荆苷峰计算应 不低于3000；

(2)对照品溶液的制备：精密称取牡荆苷对照品适量，加甲醇配制 成每1ml含20μg的溶液；

(3)供试品溶液的制备：取金莲清热颗粒样品，研细，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声处理，取出，放冷，再 称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml， 蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和正丁醇提取，提取液蒸干，用甲 醇溶解转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过， 取续滤液，即得供试品溶液；

(4)牡荆苷的含量测定方法：分别精密吸取供试品溶液及对照品溶 液各10μl，注入色谱仪测定，计算，得牡荆苷的含量；

上述超声处理是指在功率250W，频率33KHz条件下处理为60～90分 钟；

上述供试品的取样量为0.3～0.5克，精密加入甲醇50ml；

所述用水饱和正丁醇提取四次，依次采用30ml、30ml、30ml和20ml 分别提取，然后合并提取液；

所述微孔滤膜孔径为0.45μm。

本发明方法操作简便，结果准确，灵敏度高，重现性好，回收率好， 干扰小，且阴性对照溶液对测定无干扰，可以作为控制金莲清热颗粒内在 质量的有效方法。

本发明的方法同样可以作为金莲花中牡荆苷含量的测定方法。

附图说明

图1为甲醇HPLC图谱；

图2为金莲清热颗粒供试品HPLC图谱；

图3为金莲花对照药材HPLC图谱；

图4为缺金莲花阴性对照品HPLC图谱；

图5为牡荆苷对照品HPLC图谱；

图6为牡荆苷的标准曲线图；

图7不同色谱柱的试验结果，图中A-1、Appllo C₁₈(4.6×250mm) 柱-对照品，A-2、Appllo C₁₈(4.6×250mm)柱-供试品，B-1、依利特SinoChrom ODS-BP柱-对照品，B-2、依利特SinoChrom ODS-BP柱-供试品C-1、 Phenomenex C₁₈(4.6×200mm)柱-对照品C-2、Phenomenex C₁₈(4.6×200mm) 柱-供试品。

具体实施方式

下面为本发明试验及测定过程

1、试验材料

1.1仪器：TU-1800紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限公 司；

P100/UV100高效液相色谱仪，美国热电集团TSP(THERMO SEPARATION PRODUCTS)公司。色谱系统由SpectraSERIES P100色谱泵、SpectraSERIES UV100紫外检测器、7725i进样阀组成；

N2000双通道色谱数据采集器及N2000型色谱数据工作站，浙江大学 智能信息工程研究所、浙江大学智达信息工程有限公司；