[发明专利]一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的方法

说明书

一、所属领域

本发明涉及一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的方法，属于天然产物化学 研究领域。

二、技术背景

白桦树皮化学成分复杂，含三萜类物质(包括桦木醇、桦木酸、羽扇豆醇、白桦烯三醇)、 各种高级脂肪酸、氨基酸、糅质、酚类物质、还原性物质、多糖类、各种微量元素等。白桦 树皮的药用价值早在明代就有记录。文献调研表明从白桦树皮中提取的白桦三萜类粗提物对 多种肿瘤有较好的抑制作用，且具有高效低毒的良好效果，尤其是对B16黑色素瘤和S180肉 瘤的抑瘤效果最好。而更多的研究是有关桦木酸单体的抗肿瘤效果及有机合成方法，但桦木 酸单体在植物中普遍含量颇低，提取分离或者有机合成复杂，成本高，产量低，因而大大限 制其开发。

三、发明内容

本发明的目的是提供一种工艺流程简单，生产成本低，生产效率高，目标成分转移率高 的白桦树皮抗肿瘤有效部位的提取分离方法。

本发明的实现方法如下：

(1)取桦树皮最粗粉，加入8-14倍量80％或以上浓度的乙醇，加热回流提取2-4次，每次 30min-60min，合并提取液；

(2)提取液减压回收乙醇至较难浓缩，合并浓缩液，继续于敞口容器中加热尽可能挥尽乙醇， 加入过程中可加入水调节，至较难进行，放凉沉淀，加入0.5-5倍量水，进一步沉淀，过 滤或者离心取沉淀，即为提取浓缩物；

(3)提取浓缩物用5-50倍量水调节混悬后，分别用0.5-5倍量二氯甲烷萃取3-5次，合并萃 取液；

(4)二氯甲烷萃取液用0.2-2倍量1％-10％的NaOH/KOH溶液进行沉淀，回收位于 下层二氯甲烷，取混悬有沉淀的上层进行离心或者过滤，得沉淀，用水洗去残余的二氯甲 烷和碱液；

(5)然后用酸处理，充分研碎并搅拌均匀使体系充分反应，使最终pH<3，过滤或者离心，水 洗沉淀至近中性，干燥后即得产品，用HPLC法测定干燥产品中桦木酸的含量不低于20％。

四、具体实施方式

1、实施例1：

取白桦树皮最粗粉200g，用2000ml90％的乙醇回流提取2次，每次1h，合并提取液，减 压回收乙醇得浓缩液，进一步蒸发乙醇，蒸发过程中加入适量水调节，浓缩液放凉后沉淀大 量析出，加入约等量水进一步沉淀，抽滤得提取浓缩物；提取浓缩物用10倍量水调节，用1 倍量二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，然后用1/3倍量1％的NaOH溶液进行萃取沉淀，回收 二氯甲烷后，取上层混悬有沉淀的水层，3000rpm下离心10min，得到沉淀，水洗残余二氯甲 烷和碱液，再用约6M盐酸调节酸性至pH＝2左右，水洗沉淀至近中性，80℃烘箱中干燥至恒 重，得到的产品称重为11.77g，其中桦木三萜酸类含量为60.74％，桦木酸含量为21.78％。

2、实施例2：

本实施例与实施例1所不同的是将NaOH换成KOH，结果得到产品11.46g，其中桦木三萜 酸类含量为60.68％，桦木酸含量为21.71％。

3、实施例3：

本实施例与实施例1所不同的是将所用桦树皮最粗粉的量提高到4kg，并分别用40L和50L 的90％乙醇回流两次，结果得到产品218.96g，其中桦木三萜酸类含量为60.70％，桦木酸含 量为21.86％。