[发明专利]用于免疫诊断1型糖尿病的组合物

说明书

技术领域

本发明涉及自身免疫性1型糖尿病的诊断领域。更具体而言涉及使用源于 多种自身抗原的组合物诊断自身免疫性1型糖尿病的领域。

发明背景

糖尿病是一种因胰岛素分泌绝对或相对不足而引起的以高血糖症为主要特 征的代谢性疾病，受多种遗传和环境因素影响，这些因素可导致机体不能对碳 水化合物、脂肪和蛋白有效利用。糖尿病危害巨大，主要是其严重的并发症和 高死亡率。随着糖尿病得病时间的延长，体内代谢紊乱如得不到很好的控制， 可导致眼、肾、神经、血管、心脏等组织、器官的慢性并发症，以致最终发生 失明、下肢坏疽、尿毒症、脑中风或心肌梗死，甚至危及生命。糖尿病人死亡 率较非糖尿病人高11倍。全球每年死于此病的人数约为400万，占全球总死亡 人数的9％。目前，我国是糖尿病患者最多的三个国家(印度、中国、美国)之 一，糖尿病患者数量已经超过4000万人。此外，尚有数千万的糖调节功能受损 者，此类人群成为糖尿病的庞大“后备军团”。

按照1997年美国糖尿病协会及1999年WHO关于糖尿病(diabetes mellitus，DM)分类及诊断建议标准，DM分为1型糖尿病(T1DM)、2型糖 尿病(T2DM)、特殊类型糖尿病和妊娠糖尿病。T1DM包括自身免疫性(1a) 和特发性(1b)两大类。自身免疫性糖尿病主要由于胰岛β细胞自身免疫性破 坏，导致胰岛素分泌的绝对不足引起，其特性表现为外周血中出现针对胰岛β 细胞相关分子的自身抗体。1型糖尿病的发病率每年以2.5％的速率增长，预测 2010年的发病率将比1998年高出40％(Atkinson MA等，The Lancet， 358：221-229(2001))。

1型糖尿病的早期预防可分为三期：一期是有1型糖尿病发病倾向高危人群， 此时免疫学指标尚未出现。二期是免疫破坏期，此时血清内已有抗胰岛细胞自 身抗体出现，是1型糖尿病预防的关键时期。三期是1型糖尿病发病早期，此 时已出现糖尿病症状。因此如何在免疫破坏期筛检免疫学指标，对于在非糖尿 病人群中发现1型糖尿病高危人群具有重大的意义。

在1型糖尿病的免疫破坏期，患者体内会产生多种针对胰岛细胞自身抗原 的自身抗体。自20世纪70年代以来，研究者们已经发现了多种胰岛自身抗体。 例如在70年代，首次发现了胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛细胞表面抗体(ICSA)。 80-90年代，又相继发现了胰岛素抗体(IAA)、羧肽酶H抗体、热休克蛋白抗体 (HSP)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白质酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A、IA-2βA、 ICA69)等。进入21世纪，又陆续发现了热休克蛋白90自身抗体(hsp90)、胰岛 特异的葡萄糖-6-磷酸酶抗体(IGRP)、锌转运子ZnT8抗体(ZnT8)等。目前，1 型糖尿病诊断中最为常用的诊断指标包括ICA、IAA、GADA和IA-2A。

胰岛细胞抗体(ICA)是胰岛β细胞的胞浆抗体，属免疫球蛋白，对胰岛细胞 的胞浆成分产生细胞毒效应，为特异性抗体。ICA是一种混合抗体，为抗胰岛 β细胞所有抗体的总称。有文献报道ICA是与全部胰岛细胞(如α、β、γ、 δ和PP细胞)反应的多克隆自身抗体总称。ICA识别的脂类和蛋白质自身抗原 可能包括唾液酸糖缀合物、GAD、IA-2等。大量研究表明，有70％1型糖尿病 患者血清中存在ICA，且存在的时间很短，仅出现在胰岛炎发生前无高血糖阶 段及1型糖尿病的初期，具有随着发病年龄的延长而降低的特性。新发糖尿病， ICA阳性率为70-90％，ICA随着诊断后逐渐降低，诊断出糖尿病10年后，ICA 阳性率为5-10％。Jensen R等(Diabet Med，24：1221-1228(2007))的研究发 现ICA阳性的1型糖尿病患者初诊后的6年中，ICA阳性率以每年24％的比率 下降，而且平均ICA水平也逐年下降。ICA常常通过运用人、猴或啮齿类胰腺 切片进行间接免疫荧光检测。该方法发明于1974年，目前仍然在使用。但由于 该方法是检测混合抗体且方法繁琐，受到一定限制，将来应该有可能被更特异 的检测指标和更简单的检测方法所取代。