[发明专利]齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及石斛种苗的繁殖方法，更具体地说，本发明是关于齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法。

背景技术

石斛是我国传统的名贵中药材，齿瓣石斛是其中的一种，目前，齿瓣石斛种苗培育主要是以种子为外植体，利用组织培养技术获得种子实生苗，各个阶段的培养技术已基本成熟，建立了种子有性繁殖体系，但由于种源间的显著差异，导致种苗缺乏一致性和稳定性，更难以保持母株的优良性状。

发明内容

为了克服现有齿瓣石斛种子种苗繁殖技术上的不足，本发明提供一种齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，该方法培育出的种苗不仅保持母株的优良性状，而且保持高度一致性和稳定性。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：以齿瓣石斛优质单株为材料，以茎段作为外植体，经消毒处理后进行诱导培养，通过培养，茎节处可以抽出若干单芽，然后对单芽进行增殖培养、生根培养，短期内可以获得大量完整植株苗。

本发明有益效果是，该方法培育出的种苗不仅保持母株的优良性状，而且保持高度一致性和稳定性，有利于齿瓣石斛种苗的工厂化生产，同时，亦可加快品种选育研究的进程。

具体实施方式

取齿瓣石斛优质单株为材料，以茎段为外植体，具体方法包括下述步骤：(1)外植体消毒：选取茎段，用75％酒精表面灭菌30～60秒，再将其置于0.1％升汞溶液中消毒10～20分钟，然后用无菌水冲洗5～6次；(2)诱导培养：将茎段接种在诱导培养基上，诱导培养基为MS+6-BA 2～4毫克/升+NAA0.01～0.05毫克/升+椰子汁10～50毫升/升+抗坏血酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁20～50克/升+蔗糖20～40克/升，培养时间35～40天，此时茎节处可抽出许多单芽；(3)增殖培养：将单芽从茎段上切下并转接到增殖培养基中，增殖培养基为MS+6-BA 2～4毫克/升+NAA0.1～1毫克/升+椰子汁10～50毫升/升+抗坏血酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁100～150克/升+蔗糖20～40克/升，培养时间40～50天，此时可以诱导出大量丛生芽；(4)生根培养：将丛生芽接种子生根培养基中，生根培养基为MS+NAA0.1～1毫克/升+IBA0.1～1.0毫克/升+椰子汁10～50毫升/升+抗坏血酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁50～100克/升+香蕉泥50～100克/升+活性炭1克/升+蔗糖20～40克/升，培养时间35～40天，生根率可达90％以上；上述各阶段培养条件为温度25±2℃，光照强度1500～2000l_x，光照12小时/天，环境噪声小于40分贝。