[发明专利]纳米小分子透明质酸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种纳米小分子透明质酸的制备方法，具体地讲是将大分子量的透明质酸通过酶等水解方法，获得平均分子量1000道尔顿以下的超低分子量透明质酸，即纳米级寡聚透明质酸(NOHA)。用本方法得到的纳米小分子透明质酸具有与普通透明质酸显著不同的促进血管形成、促进创伤愈合、显著的皮肤亲和性和渗透性等功能特点，可以作为良好的医药、保健品、化妆品原料。

背景技术

透明质酸(HA)，是存在于生物体特别是皮下组织的粘多糖类，由于其高保湿功能，作为透明质酸被广泛应用在化妆品原料中。此外，通过口服摄取透明质酸或其盐，补偿生物体原本具有的透明质酸含量的降低，可看到改善肌肤的保湿、弹性和柔软性的效果。因此，透明质酸或其盐可以用于食品或药品。

透明质酸是极高分子的多糖类，分子量从50万到300万道尔顿，具有高粘度，1％的水溶液已经是粘稠的了，所以，透明质酸的使用存在缺陷，用于化妆品，由于其超大分子量，其护肤作用主要体现在外部保湿，它几乎难以渗透到皮肤内部，对于皮肤内在的营养和修护基本没有什么作用；作为食品或食品添加剂，由于粘度高，妨碍添加量，口感差，消化吸收性能差，美容功能难以实现。

研究表明，透明质酸的生物活性与其聚合度有关，聚合度越小生物活性越高。聚合度减小，分子量降低，粘度降低，使用性能大大提高，当分子量降到1000道尔顿附近时，即得到寡聚透明质酸(聚合度小于10，分子量小于4000)，其功能大大增强，且表现出普通透明质酸所不具备的功能特性，如促进血管形成、促进创伤愈合、抗肿瘤、免疫调接等生物活性。而纳米小分子透明质酸(聚合度小于5，平均分子量小于1000)，性能尤其优于高聚合度的O-HA，在皮肤上表现为极好的皮肤亲和性、快速的渗透性、美容修复功能。

通过降解大分子量透明质酸，可以得到低聚合度的透明质酸。透明质酸的降解方法有多种，如物理法，通过加热、机械剪切力、紫外线、超声波、钴照射等因素均可使透明质酸降解，但其降解的力度有限，难以得到纳米小分子透明质酸；化学降解法，有酸水解、碱水解、次氯酸钠氧化降解等，化学降解法降解过程较难控制，容易产生褐变和有机溶剂残留。日本吉田拓史采用酸性介质的水解方法(专利申请号200680008997.9)，其采用乙醇或丙酮溶剂的酸性介质条件下，把透明质酸分子量降到10000一下；生物降解法，在透明质酸酶的作用下降解，降解强度低、周期长等缺点，崔向珍等在“透明质酸酶催化透明质酸水解的最适反应条件”刊文中，可以把分子量控制在10000一下。

本发明通过生物酶与酸降解结合的方法，将大分子的透明质酸降解为分子量分布在1000以下的纳米小分子透明质酸。以实现其皮肤美容、细胞快速美容、便于消化吸收的目的。

发明内容

本发明的目的之一是通过酶法与酸降解法的结合，得到分子量可控的纳米小分子透明质酸水解物。

一种以大分子量透明质酸或其盐为原料，通过降解得到的纳米小分子透明质酸，其平均分子量在1000道尔顿以下，透明质酸一聚体、二聚体、三聚体、四聚体含量超过90％。

一种纳米小分子透明质酸的制备方法，是酸性介质水解和酶降解两步的结合。

一种纳米小分子透明质酸的制备方法，其透明质酸原料，是指透明质酸或其盐，透明质酸是指以葡萄糖醛酸和N-乙酰胺基葡萄糖这两种糖为重复构成单元的多糖类，其盐类没有限定，例如钠盐、钾盐、钙盐、锌盐、镁盐、铵盐等。它一般是以鸡冠、脐带、眼球、皮肤、软骨等生物组织或者培养链球菌属微生物等通过发酵法得到的透明质酸或其盐。

一种纳米小分子透明质酸的制备方法，其两步反应所用介质是水，可以不使用有机溶剂，不使用氧化剂。

一种纳米小分子透明质酸的制备方法，在酸性介质下首先水解，是指在pH值1.5～4，透明质酸浓度0.1～6％，水解温度70～95℃，水解时间为1～5小时。

一种纳米小分子透明质酸的制备方法，经过酸性介质下水解后，继续进行酶降解，酶降解所用的酶是透明质酸酶，降解反应条件是，pH值4～7，透明质酸浓度0.1～6％，水解温度20～70℃，水解时间为1～5小时。

用本方法得到的纳米小分子透明质酸，具有高度的皮肤亲和性和渗透性，能促进毛细血管的生成、促进创伤愈合、促进胶原蛋白合成。本产品用于食品，具有适口性强、口感好、易消化的特点。具有增强免疫能力、促进骨骼形成的作用，对于全身皮肤的保湿、嫩滑、降低皮肤干燥、治疗皮肤粗糙、提高皮肤弹性、减轻皱纹，效果显著。

下面结合实施例对本发明进一步说明：